sds表面活性剂怎么配
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发布时间:2024-10-19 19:46
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时间:2024-11-10 13:53
实验材料
(一)试剂
1、30%丙烯酰胺混合液(Acr:Bis 为 29:1) 称取丙烯酰胺(Acr ) 29g 及甲叉丙烯酰胺(Bis ) 1.0g ,用 去离子水溶解并稀释至 100ml ,贮棕色瓶中于 4℃保存,可用一个月。
2、1.5mol/L pH8.8 Tris-HCl缓冲液 取 1mol/L HCL溶液 48ml 、三羟甲基甲烷(Tris ) 36.6g ,加双蒸馏水 至 80ml 使其溶解,调 pH 至 8.8,然后用双蒸馏水稀释至 100ml ,置棕色瓶中, 4℃贮存。
3、1.0mol/LpH6.8Tris-HCl缓冲液 取 1mol/L HCL溶液 48ml , Tris5.98g , 加双蒸馏水至 80ml , 调 pH6.8, 用双蒸馏水稀释至 100ml ,置棕色瓶中, 4℃贮存。
4、Tris-甘氨酸电泳缓冲液 称取 Tris 6g、 甘氨酸 28.8g , 加蒸馏水 850ml , 调 pH 至 8.3, 加蒸馏水到 1000ml , 4℃贮存。用时可做 10倍稀释。
5、10% 过硫酸铵(AP )(6)四甲基乙二胺(TEMED )或 β-二甲基氨基丙腈(DMAPN )。
6、10%SDS(十二烷基磺酸钠) 称取 SDS 10g,加蒸馏水 100ml 使其溶解。
7、四甲基乙二胺(TEMED )
8、上样缓冲液 取 1.0mol/LpH6.8Tris-HCl缓冲液 6.25ml ,蔗糖 10g , SDS 2.3g, 1g/L溴酚蓝 10ml ,加 蒸馏水溶解,混合至 100ml。
9、考马斯亮蓝染色试剂 考马斯亮蓝 R250染色液:浓度为 2.5g/L,用甲醇∶醋酸∶蒸馏水 =5∶ 1∶ 5的溶 液配制(V/V)。
10、脱色液:取冰醋酸 7.5ml 、甲醇 5ml ,加蒸馏水至 100ml。
11、蛋白质分子量标志物 市售中分子量蛋白质分子量标志物。也可选择 5种以上的已知分子量蛋白质自 行配制,注意其分子量分布要能满足需要,各种蛋白质的浓度基本相等。