如果是载体是环形基因,PCR扩充目的基因时, 限制酶的切法

发布网友发布时间：2023-07-14 17:04

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热心网友时间：2024-12-12 17:11

PCR扩增目的基因时，用*酶的切取目的基因就可。与载体没有关系。载体是在构建表达载体时才用。*酶切获取目的基因，一般都用同种*酶，从外源基因上切两刀即可获取目的基因，多位黏性末端。PCR扩充目的基因时，需要用的是引物。载体是环形基因，用同种*酶切一刀，插入目的基因即可。

热心网友时间：2024-12-12 17:12

装载体时，PCR扩充目的基因后，用*酶的切取，得插入部分。
载体用相同或者同源*酶的切取，即末端和PCR的是互补的，得到载体部分。
如果用双酶切，一般酶切后可以直接纯化回收后连接。
如果单酶切，一定要去磷酸化处理，即CIP，然后纯化回收后连接，否则会有很多空载体的出现。
希望对你有帮助。