冰冻切片衰老染色怎么防止蒸发
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发布时间:2023-08-16 15:29
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热心网友
时间:2023-09-06 18:40
步骤如下:
1、冰冻切片固定:冰冻切片37℃烘烤10至20分钟,控干水分,置于4%多聚甲醛固定30min,于PBS缓冲液中晃动洗涤3次,每次5分钟。
2、抗原修复:将切片浸没在升满EDTA抗原修复缓冲液(PH8.0)的修复盆中,置于微波炉内进行抗原修复,修复条件:中火8min至沸到停火8min保温到中低火7min(整个过程需防止修复液过度蒸发。
3、画圈血清封闭:切片稍甩干后,用组化笙在组织周围画圈,滴加组织自发荧光淬灭剂A液,室温孵育30min,纯水洗5分钟,接着滴加BSA牛血清白蛋白,封闭30min。
4、等待完成:封闭后取出,之后使用就会防止蒸发了。