怎样提取质粒?

发布网友发布时间：2022-05-04 18:06

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热心网友时间：2022-06-24 13:23

①差速离心。蛋白质等物质可用酚-氯仿变性沉淀，然后用高浓度乙醇提取DNA，然后再溶解。高速离心，可分离染色体DNA和质粒DNA。
②凝胶电泳，分离出DNA后，可能含有RNA，可用Rnase（RNA酶）将RNA水解，将迁移最慢的条带（染色体DNA）剪去，剩余的便是质粒DNA，可用洗脱液洗脱下来。
③碱变性裂解法，细菌悬浮液在高碱性条件下，染色体和蛋白质变性，质粒DNA由于其超螺旋共价闭合结构，双链不会分离，再以PH4.8的高盐缓冲液调节其PH至中性，质粒DNA可再度复性，其速度比染色体DNA复性快，重新溶于溶液，进一步除去蛋白质等杂质可再提高纯度。

热心网友时间：2022-06-24 13:23

有专门的试剂盒可以提取出质粒啊，比如Axygen，还有Sigma的