高效液相色谱法配流动相需要注意什么

1. 确保冲洗系统：定期冲洗色谱柱以维持其性能，避免磷酸盐析出堵塞管路。2. 维护进样口：实验结束时使用纯水冲洗进样口，确保无残留物质。3. 清洗泵头：流动相中磷酸盐容易在乙腈中析出，每日实验前后使用10%的乙腈水或甲醇水冲洗泵头，防止堵塞。4. 色谱柱处理：使用至少30分钟、最好是40分钟的冲洗...

有些酸并不适宜作为流动相，如盐酸、长期使用可能损坏泵及相关的钢制管线。注意选择合适的截止波长的溶剂作为流动相。紫外分析时，样品的检测波长至少应大于所用溶剂的截止波长20nm。3、配置的盐溶液用滤膜过滤 常规液相用0.45µm滤膜过滤，高效液相色谱使用0.2µm滤膜过滤。水或缓冲盐溶液置...

过滤溶剂、保持储液瓶清洁、确保溶剂质量、防止流动相脱气不充分是流动相使用中的重要注意事项。气泡的产生与流动相的气泡和杂质控制紧密相关，这些因素都会影响柱效、基线稳定性及检测准确性。为此，应采用有效的脱气方法，如真空脱气、超声波脱气或氦气脱气，以去除流动相中的气体。流动相供给问题包括供给不...

3、流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。4、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。5、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

液相色谱法所用流动相使用时应注意问题如下：尽量使用高纯度溶剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。不纯的溶剂会引起基线不稳，产生伪峰。避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降和损坏色谱柱，如使固定液溶解流失和酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。样品在流动相中应有适宜的溶解度...

（1）溶剂对于待测样品。必须具有合适的极性和良好的选择性。（2）溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时，溶剂对此辐射产生强烈吸收，此时溶剂被看作是光学不透明的，它严重干扰组分的吸收测量。...

流动相要先过滤，超声脱气后方可使用。另外选用试剂是要选用色谱级的，过滤时选择合适的滤膜。流动相最好现配现用，不要保存太长时间。使用旋转蒸发仪上的真空泵 抽空气20min，可以达到脱气的作用。使用滤膜过滤掉杂质。流动相必须过滤膜，用前要超声除气泡半个小时左右，否则基线不稳 仪器和色谱柱先要...

注意冲洗色谱柱；注意冲洗进样口；注意清洗泵头 所有的目的都是为了不让无极盐析出。因为磷酸盐的水溶性还不错，不过在有机物当中的溶解度就不好了。它遇到甲醇、乙腈容易析出。然后就会把液相管路堵住。比如，你的流动相是0.05mol/L的KH2PO4-乙腈，每天早上开始使用仪器前，还有每天使用完仪器之后...

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时，流动相在恢复到室温前，基线水平很难稳定，特别是发生漂移，也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时，混合液变化大，往往会与室温相差很大，务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水，水相流动相需经常更换，防止长菌变质...

高效液相色谱分析操作应注意：1)．流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2)． 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。3)． 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4)． 压力不能太大，最好不要超过2000 psi。