高效液相色谱法中的样品和流动相在使用前需要注意什么?

在使用液相色谱法时，以下是一些需要注意的问题：1. 确保使用高纯度的溶剂作为流动相，以防止长期累积的微量杂质损坏色谱柱或增加检测器的噪声。2. 避免使用不纯的溶剂，因为它可能导致基线不稳定和伪峰的产生。3. 注意流动相与固定相之间的相互作用，以免降低柱效或损坏色谱柱。例如，固定液的溶解流失或...

为避免溶剂的温度变化影响密度，建议在使用前将溶液调至接近室温。在液相色谱过程中，流动相应具备以下特点：能溶解样品组分，防止沉淀；与样品不产生化学反应；黏度小以提高分离效果，减少柱压降；与检测器相适应；沸点不宜过低以避免产生气泡。流动相配制完成后，需进行脱气，去除溶解的微量气体，以防止干扰...

液相色谱法所用流动相使用时应注意问题如下：尽量使用高纯度溶剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。不纯的溶剂会引起基线不稳，产生伪峰。避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降和损坏色谱柱，如使固定液溶解流失和酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。样品在流动相中应有适宜的溶解度...

3. 清洗泵头：流动相中磷酸盐容易在乙腈中析出，每日实验前后使用10%的乙腈水或甲醇水冲洗泵头，防止堵塞。4. 色谱柱处理：使用至少30分钟、最好是40分钟的冲洗时间来清洗250mm*4.6mm的色谱柱，并在封存时使用纯甲醇或乙腈。5. 进样口注意事项：若使用流动相溶解的样品，实验结束后应注入大体积的...

先用水或低浓度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗。5、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱。6、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围。7、水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质。

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时，流动相在恢复到室温前，基线水平很难稳定，特别是发生漂移，也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时，混合液变化大，往往会与室温相差很大，务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水，水相流动相需经常更换，防止长菌变质...

1、一般使用前用80%的甲醇冲洗20倍（推荐值）柱体积，应考虑柱前仪器的死体积（约5-10ml），可以不接柱子大流速3-5ml/min，冲3-5分钟，然后更换流动相即可。2、使用后用可用80%甲醇冲洗保存，如果长期不使用，建议用纯甲醇或乙腈保存。原则上是根据流动相组分不要在柱子中产生难溶有机盐类。

4. 预防液相泵的故障 处于良好操作状态的泵，应该能使色谱图上的基线平稳；保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。 要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施：1）用高质量...

高效液相色谱法对流动相的要求如下：1、选用的溶剂应当与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性。2、选用的溶剂应有高纯度，以防所含微量杂质在柱中积累，引起柱性能的改变。3、选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配，如果使用紫外吸收检测器，就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂；若使用...

一、操作步骤：1.开机前先将流动相过滤和超声：水流动相用混合滤膜（0.2μm）过滤,有机流动相用有机滤膜过滤，之后超声脱气15-20分钟。（过滤的目的是除去流动相里的杂质，以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱；超声的目的是排除流动相里面的气体，以防气体进入色谱柱损害色谱柱，影响柱效能）注：试验过程中...