发布网友 发布时间:2022-05-24 18:30
共1个回答
热心网友 时间:2023-10-25 05:59
病毒名称:木瓜环斑病毒-西瓜株系Papaya.ringspot.virus.-watermelon.strain,PRSV-W。分类地位:马铃薯Y病毒属Potyvirus,马铃薯Y病毒科Potyviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.057.0.01.045。病毒异名:西瓜花叶病毒1号(WMV-1)。病毒提纯:接种后3~4周采集南瓜病叶100g,加入预冷的.200ml.含0.1%.亚硫酸钠的0.5mol/L磷酸钾(pH7.5)缓冲液(PB),50ml氯仿和50ml四氯化碳研磨匀浆。1000r/min,离心5min。100mlPB悬浮沉淀再离心。把两次离心的上清液合并。13000r/min,离心15min。留上清液。加入TritonX-100至1%(V/V),PEG(分子质量6000~8000u)到4%(W/V)。氯化钠到100mmol/L,4℃下轻轻搅拌1h。10000r/min,离心10min。加入50ml20mmol/LPB悬浮沉淀。12000r/min,离心10min。弃沉淀。上清液加入PEG到8%(W/V),氯化钠到100mmol/L搅拌30min。12000r/min,离心10min。加入5~10ml20mmol/LPB悬浮沉淀。5℃下,上清液经20mmol/LPB含30%(W/W)氯化铯或硫酸铯垫140000r/min,离心16~18h。收集病毒带。等体积20mmol/LPB稀释。12000r/min,再离心10min,用PEG沉淀病毒。病毒产量5~10mg/100g组织。病毒理化特性:①病毒粒子。病毒粒子线状,750~780nm×11~13nm。氯化铯浮力密度1.32g/cm3。A260/A280:1.2。沉降系数39.S。②核酸。正单链RNA。③蛋白。两组分,分子质量3.1×10^4~3.4×10^4u和2.6×10^4~2.7×10^4u。