胶回收产物浓度多大正常

发布网友发布时间：2022-05-12 06:03

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热心网友时间：2022-06-09 03:01

胶回收产物浓度在0.03pmol/ul浓度属于正常。

胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性(电荷)和疏水性使DNA与柱子结合。因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul(PH 5.0，3mol/L的 NaAC);为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30%异丙醇在加热溶解胶后的液体里。

将柱子在室温放置几分钟(大约需10分钟)，以使乙醇充分挥发。少加些洗脱液，尽量减少回收体积，一般用30-50μl洗脱液洗脱(不能太少，否则无法浸湿膜反而不利于洗脱)。洗脱液滴在膜*，以充分洗脱结合在膜上的DNA。

胶回收产物介绍：

如果要胶回收，最好还是用试剂盒，方便，回收率也略高。实在要手工回收，可以切胶后加入3倍体积TE，水浴熔化，酚、酚/氯仿抽提干净，乙醇沉淀即可。如果PCR扩增特异性好，只是简单的PCR产物纯化回收。

可以在PCR产物中加入50ug/ml 的蛋白酶K，37度1h，酚/氯仿抽提一次，氯仿抽提一次，上清加入0.1体积的醋酸钠，2.5体积的无水乙醇沉淀回收。