如何提高凝胶回收目的dna的产率
发布网友
发布时间:2022-05-12 06:03
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热心网友
时间:2022-06-09 03:00
有好几年没做实验了,不过我对1楼的回答有些疑问,现在有能做23000bp这么长的PCR?似乎我印象中PCR要这么长的长度本身就很难能全长扩增吧。
那么如果我的理解没错的话,楼主是不是直接从土壤的细菌里头直接提取DNA。(呵呵,我也忘了细菌DNA大概多长),跑了一次电泳,然后把目的片断割下来,再纯化,再跑电泳,发现纯化之后的片断比目的片断小了。
检测回收率,你可以在DNA溶解液过柱之后,柱子洗脱之前在柱子上加试剂盒溶解液,吹打几次吸取一些溶液A,同时吸取一些离心下来的溶液B,再将过柱后的洗脱液C,以及未过柱前的溶液D(如果浓度太低,可相应浓缩)肆个溶液再上一次凝胶电泳,一切都将看得明明白白,究竟你在过柱的这个过程中,DNA到底留在了什么地方。
我相信有这个电泳图的话,应该可以很容易理解问题所在了。当然问题有可能象1楼所说的那样,天根的产品不过关(或者是你自己没有选对),那就换柱子!