卵黄抗体肌是什么?

发布网友发布时间：2022-05-10 15:17

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热心网友时间：2023-10-13 05:20

对于家禽来讲，高滴度的抗体不仅产生在血清中，在卵黄中也会产生。因此，可以用特异性的弱毒苗或组织灭活苗多次免疫接种健康禽，待其卵黄内抗体滴度达到一定高度后，收集其所产之卵，制备卵黄抗体，同样可用于特异疫病的紧急预防和治疗。卵黄抗体，也称高免卵黄液。

热心网友时间：2023-10-13 05:20

　　卵黄抗体的制备：水稀释法　　先将卵黄液用蒸馏水稀释10倍，调整pH值至5.0～5.2，4℃静置6h以上，上清液即为水溶性组分。水稀释法工艺简单，若采用适当的方法进行纯化，可获得较高的回收率和纯度。
　　有机物沉淀法　　聚乙二醇（PEG）法是较常用的方法。Bizanov和Normantiene用仙台病毒免疫产蛋母鸡，收获高免鸡蛋。以TBS作为缓冲液，将卵黄液稀释4倍后，加入35%的聚乙二醇6000，沉淀脂类，卵黄囊抗体保留在上清液中。应用这种方法从每毫升卵黄液中获得约45mg的特异性卵黄囊抗体，纯度达95%。
　　有机溶剂抽提法　　脂类易溶于有机溶剂，可采用氯仿、丙酮等有机溶剂进行分离。用经TBS冲洗过的鸡蛋黄制成15ml蛋黄液，加入40ml TBS充分混匀后加入40ml氯仿，冷冻离心，分三相。弃去氯仿层，保留水层，中间的半固体相用40ml TBS萃取，取水层，与前一步水层合并即为水溶性组分。

　　天然胶法　　一些天然胶如卡拉胶和黄原胶等可用于卵黄抗体分离。将9倍体积的01%（w/v）卡拉胶溶液与卵黄混合，离心得到水溶性组分。也可将卵黄先用双蒸水稀释1倍后再与4倍体积的黄原胶混匀，离心即得水溶性组分。使用天然胶法去除脂类效果较好，获得的水溶液中脂类含量少于04%。
　　中链脂肪酸法　　辛酸是用于卵黄囊抗体分离最常用的中链脂肪酸。蛋黄用去离子水稀释75倍，混匀，离心，上清液再用醋酸盐缓冲液稀释2倍，调pH值至50，加辛酸至终浓度为1%，静置分层，卵黄囊抗体在水层中。

　　去污剂分离法　　Sriram等比较了几种去污剂包括阴离子、阳离子和非离子型去污剂，发现用溴化十六烷基三甲铵进行分离，脂类的残留量不足3%，而用十二烷基磺酸钠分离残留量最高，为14%～35%。用非离子型去污剂辛苯聚醇8（TRITON.RTM.X114）分离时，蛋白回收率可达85%～95%。Stalberg等利用TX100进行分离，蛋白回收率可达97%。

　　超临界气体提取法　　该法的基本原理是在高压下二氧化碳液化，将卵黄中的脂溶性物质溶解在其中，并随气流带走。将卵黄粉末装入超临界气体抽提装置，通入300kg/cm2，40℃二氧化碳超临界气体与卵黄粉末混合，在60kg/cm2，40℃的减压条件下，被抽提出的杂质与超临界气体分开而进入分离室，即可得到去除脂类的卵黄粉末。将去脂的卵黄粉末溶于20倍磷酸盐缓冲液中，搅拌，离心，即可得水溶性组分。

　　卵黄囊抗体的提取方法　　提取的目的是将大量卵黄囊抗体从水溶液中分离出来，得到卵黄抗体。目前主要通过超滤法或沉淀法来实现。沉淀法所用的沉淀剂包括无机物、有机物或有机溶剂，也可以采用多种方法联合沉淀，或者沉淀法和超滤法相结合的方法提取卵黄囊抗体。

　　超滤法　　超滤法具有浓缩、除盐、分级和纯化作用。卵黄囊抗体的分子量约为180kD，在提取时可采用截流值为100kD的超滤膜。研究表明，在水稀释法分离后经硫酸钠沉淀，超滤，回收率为98mg卵黄囊抗体/ml蛋黄，纯度94%。超滤法具有所需设备较简单、操作方法简便等优点，适合大规模工业化提取卵黄囊抗体。