dna聚合酶经过透析后活性下降的原因
发布网友
发布时间:2022-05-10 10:55
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热心网友
时间:2023-10-06 08:08
可能是透析后的buffer不适合DNA聚合酶发挥活性,DNA聚合酶使用时需要加入含镁离子的反应缓冲液,另一种可能就是透析后体积变大了,这样酶就被稀释了,如果还是同样体积检测那总酶量就会降低一些.那活性肯定会有所下降。
DNA聚合酶(DNA
polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶
,
以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
热心网友
时间:2023-10-06 08:09
你好!
DNA聚合酶有很多种,比如Phi29,T4,BST等。保存缓冲液和反应缓冲液都不相同。
比如Phi29需要反应时加入dNTP,BST反应时需要65度孵育等。
如果透析后的缓冲液不合适,活性就会降低。
如果透析后体积增大,浓度降低,再加入一样的体积反应,活性也会降低。
如有疑问,请追问。