细胞的生活需要什么
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发布时间:2022-04-21 18:41
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时间:2022-07-18 15:17
重点知识
1.细胞中的物质组成
(1)有机物:一般含碳,如糖类、脂肪、蛋白质、核酸等,能燃烧。
(2)无机物:一般不含碳,如水、无机盐、氧气、二氧化碳(虽然含碳,但属无机物)。
2.细胞膜控制物质的进出
一般地说,细胞膜能让有用的物质进入细胞,把其他物质挡在细胞外面,同时,还能把细胞内部产生的废物排到细胞外。
3.细胞中能量的来源
4.多莉羊的诞生:多莉羊与提供细胞核的母羊一模一样,说明细胞核控制生物的遗传和发育。
5.细胞核中被染成深色的物质是染色体,它由蛋白质和DNA组成。DNA上具有遗传信息的片段叫基因。
6.细胞是物质、能量、信息的统一体。
(1)细胞的生活需要物质和能量。细胞膜能够控制物质的进出。叶绿体能将光能转化成化学能,并将化学能储存在有机物中。线粒体能够将有机物中的化学能释放出来,为细胞的生活提供动力。
(2)细胞中物质和能量的变化非常复杂,细胞的控制中心就是细胞核。
7.生物体由小长大与细胞的生长、*和分化是分不开的。
8.细胞的生长:结果是细胞的体积由小变大,细胞数量不变,遗传物质不变。
9.细胞的*:结果是一个细胞*成两个细胞,细胞数目增加,遗传物质不变。
(1)步骤
①细胞核由一个分成两个。
②细胞质分成两份,每份各含一个细胞核。
③在原来的细胞*形成新的细胞膜,植物细胞还形成新的细胞壁。
(2)特点:细胞核*时,染色体的变化最明显,它先复制再均分,此时,产生的两个新细胞的染色体数量和形态相同,新细胞与原细胞的染色体数量和形态也相同。
10.细胞的分化:结果是形成不同的组织(细胞),遗传物质不变。
在发育过程中,通过受精卵*出来的细胞在形态、结构上发生变化,使不同细胞具有不同的功能的过程。
11.单细胞生物:身体只由单个细胞构成。如细菌、酵母菌、草履虫、衣藻、眼虫、变形虫。
(1)草履虫的结构图
与运动有关的是纤毛;
与呼吸有关的是表膜;
与摄食有关的是口沟;
与消化有关的是食物泡;
与排泄有关的是表膜、收集管、伸缩泡;
与繁殖有关的是细胞核;
与排遗有关的是胞肛。
(2)单细胞生物与人类的关系:有的有益,有的有害。
12.细胞是完成生命活动结构和功能的基本单位:单细胞生物可以独立完成生命活动;多细胞生物按照一定的结构层次构成生物体,完成生命活动
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时间:2022-07-18 16:35
1、合适的细胞培养基
合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。
2、优质血清
目前,大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中最重要的成分之一,含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。
3、无菌无毒细胞培养环境
无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物质污染,或者自身代谢物质积累,可导致细胞中毒死亡。因此,在体外培养细胞时,必须保持细胞生存环境无菌无毒,及时清除细胞代谢产物。
4、恒定的细胞生长温度
维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定适宜的温度。
5、合适的气体环境
气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳。
细胞培养基种类与基本成分
细胞培养基的种类很多,按其来源分为合成培养基和天然培养基(目前使用的培养基绝大部分是合成培养基),按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌,液体培养基由专业商家提供,用户可直接使用,非常方便。
1、合成培养基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质:
氨基酸
氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2 周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
碳水化合物
碳水化合物是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
无机盐
培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外,通过提供钠,钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素, 细胞通常可耐受260mOsm/kg ~320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES 时需按以下方法调节钠离子浓度。
缓冲系统
大多数细胞所需pH 在 - 。但是,细胞培养最适pH 值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH - , 而传代转化细胞系则需要偏酸pH - 。
由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2 体系进行缓冲,因此,气相中的CO2 浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2 浓度设定在5%,培养液中NaHCO3 的加入量为L;如果CO2 浓度维持在10%,培养液中NaHCO3 的加入量为L。
细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES 是一种非离子缓冲液,在pH - 范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES 缓冲液可与低水平的碳酸钠(L)共用,以抵消因额外加入HEPES 引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH 指示剂,酸性培养液呈橙*,碱性培养液呈深红色。
维生素
在细胞培养中,尽管血清是维生素重要来源, 但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。
其它成分
在一些较为复杂的培养液中还包括其它一些成分。如在杂交瘤技术中常用的DMEM 培养液,使用时还需要补加丙酮酸钠和2-巯基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-Me)。2-Me 对细胞生长有很重要的作用。有人认为它相当于胎牛血清,有直接刺激细胞增殖作用。2-Me的活性部分是硫氢基,其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽,能诱导细胞的增殖,为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。另一个重要作用是促进*原的反应和DNA 合成,增加植物凝集素(PHA)对淋巴细胞的转化作用,已广泛应用于杂交瘤技术,另外,也开始用于一些难以培养的细胞。2-Me 是一种小分子还原剂,极易氧化。分子量为,纯的2-Me 是一种无色有刺激味的液体,比重为,常用终浓度为5×10-5M。常配制成 的储存液,用时每升培养液加。
液体培养基保存:
液体培养基应于4℃冰箱避光保存,实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12 个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良,可以再添加适量L-谷氨酰胺。
干粉培养基保存:
4℃冰箱避光保存,有效期36 个月。
血清
细胞培养液中添加的血清有牛血清、马血清、人血清等,其中牛血清是最常用的血清,分为胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是从母牛破腹取出的胎牛中分离出的血清,价格昂贵。新生小牛血清是从刚出生的尚未哺乳的小牛中分离出来的血清,如厂家能做到这一点,新生小牛血清的质量与胎牛血清的质量相差不大。如小牛出生后已哺乳,从这种小牛中取出的血清中可能含有较多的生物活性物质,其质量明显不如前两种。
血清的质量,种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长,而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同,尤其是对克隆细胞的生长,某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此,在购买大量血清之前,必须对血清支持细胞生长能力进行检测,然后再大量购买质量好的同一批号的血清,并注意以下几点:
(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ – 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1 个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
(2)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1 天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
(4)热灭活是指56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
(5)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。
(6)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5 分钟去除,也可不用处理。
显微镜下“小黑点”:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。
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时间:2022-07-18 18:10
细胞的生活需要物质和能量,细胞中的物质可以分为两大类:一类是分子比较小的,一般不含碳,如水、无机盐、氧等,这类物质是无机物;一类是分子比较大的,一般含碳,如糖类、脂类、蛋白质和核酸,这类物质是有机物.
细胞质中有叶绿体和线粒体两个能量转换器,叶绿体能把光能转换成化学能储存在制造的有机物中,叶绿体能把储存在有机物中的化学能转化成可以利用的能力,释放出来,供细胞的生命活动利用.
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时间:2022-07-18 20:01
细胞的生活需要物质和能量
1.细胞中的物质分为:有机物:糖类、脂类、蛋白质、核酸 。无机物:水、无机盐、氧。
2.一般细胞中带酸味和带甜味的物质存在于细胞液泡中的细胞液中。
3.细胞膜控制物质的进出
4.在细胞质中有能量转换器