发布网友 发布时间:2024-10-22 20:13
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热心网友 时间:2024-10-23 17:30
在细胞转染的分类中,化学方法占据重要地位。首先,DEAE-葡聚糖法以其早应用历史而知名,作为阳离子多聚物,它与核酸结合后能被细胞膜摄取,适用于瞬时表达研究,但稳定性转染效果有待提高。磷酸钙法,通过与DNA和氯化钙的共沉淀过程,广泛用于瞬时和稳定转染,DNA通过细胞膜的内吞作用进入细胞。这种方法还具有保护外源DNA免受降解的优势。
人工脂质体法则以高效转染闻名,能处理不易转染的细胞系,甚至不同长度的DNA、RNA和蛋白质。它适用于瞬时和稳定表达,尤其在基因治疗中展现出巨大潜力。阳离子脂质体与核酸形成复合物,复合物被细胞内吞后,DNA进入细胞核的过程尚不完全清楚。
与化学方法相比,物理方法如显微注射、电穿孔和基因*则提供了另一种转染途径。显微注射虽繁琐,但能高效导入细胞或核内,适用于制备转基因动物,而不适用于大规模转染。电穿孔和基因*则适用于不易转染的细胞类型,如电穿孔通过电流导入,基因*则利用高速粒子将核酸送入细胞。
转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。