血清碱性磷酸酶试剂
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发布时间:2024-10-22 10:19
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时间:2024-10-22 10:25
以下是血清碱性磷酸酶试剂的详细配制步骤:
1. 比色法所需溶液:
0.1 mol/L 碳酸盐缓冲液:将6.36 g无水碳酸钠、3.36 g碳酸氢钠和1.5 g 4-氨基安替比林溶于800 ml蒸馏水中,转移至1000 ml容量瓶,加蒸馏水至刻度,存于棕色瓶中。
20 mmol/L 磷酸苯二钠溶液:称取2.18 g磷酸苯二钠,加入沸腾的500 ml蒸馏水,冷却后加2 ml氯仿防腐,冰箱保存。
铁氰化钾溶液:称取2.5 g铁氰化钾和17 g硼酸,分别溶解于400 ml蒸馏水中,混合后加水至1000 ml,避光保存,蓝色绿色溶液需废弃。
酚标准贮存液(1 mg/ml):1.0 g重蒸馏酚溶于0.1 mol/L 盐酸中,加至1000 ml刻度,也可购买现成标准液。
酚标准应用液(0.05 mg/ml):取5 ml酚标准贮存液,加蒸馏水至100 ml。
2. 连续监测法所需溶液:
1.8 mol/L AMP缓冲液(pH 10.3): 混合2-氨基-2甲基-1-丙醇(AMP, MW 89.14)160 g和1 mol/L盐酸320 ml,加入500 ml新沸并冷却的蒸馏水,调至pH 10.3±0.02(30℃),再加蒸馏水至1000 ml,存于冰箱中。
10.5 mmol/L 氯化镁溶液:0.21 g氯化镁溶解于水中,稀释至100 ml,室温保存。
31.5 mmol/L 磷酸对硝基苯酚溶液(4-NPP): 称取磷酸对硝基苯酚二钠盐(含6分子水, MW 371.15)120.8 mg,溶于100 ml蒸馏水中,存于棕色瓶冰箱中。
底物缓冲液:将0.84 mol/L AMP、15 mmol/L 4-NPP、0.5 mmol/L MgCl2三种溶液按10:10:1比例混合,37℃预热后待用。