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Epigenetics甲基化敏感限制性内切酶(MSRE)法

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热心网友 时间:9小时前

Epigenetics的甲基化敏感限制性内切酶(MSRE)法是一种利用特定酶对DNA甲基化状态进行检测的技术。MSRE是一类酶,它们对含有甲基化的识别位点特别敏感,已知至少有320种。这类酶的特性在于,如果它们的切割位点中包含一个或多个甲基化碱基,大部分将无法切割DNA。MSRE法的原理基于II型甲基化敏感限制性内切酶对甲基化CpG序列的识别行为。具体操作中,首先利用这种酶及其对甲基化不敏感的同工酶,切割含有甲基化CpG序列的DNA片段,然后通过DNA印迹技术进行分析。

这种方法的一大优点在于其高度的通用性,无需详细了解靶DNA的一级结构,可以直接评估CpG岛的甲基化状态。通过定量分析,可以获取关于特定基因甲基化水平的详细信息。然而,MSRE法也存在局限性,它要求大量的高相对分子质量DNA(至少5微克),并且只能检测到拷贝数占比较高(通常大于百分之几)的甲基化等位基因。此外,它提供的信息仅限于MSRE识别序列中CpG岛的甲基化状态,对于其他区域的甲基化状况则无能为力。
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