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用deseq2如何筛选差异基因?

发布网友 发布时间:4小时前

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热心网友 时间:2024-10-16 23:38

为了筛选差异基因,我们将使用Deseq2进行转录组分析。首先,确保你已经安装了RStudio,这是执行分析的必要环境。接下来,准备两个关键文件:基因表达量count数据以及样本信息文件。表达量数据应为每一行为一个基因,每一列为一个样本,而样本信息应包含样本名称与对应处理或类型。

开始实操阶段,打开R,加载所需包与数据集。检查基因表达量与样本信息是否匹配,若匹配结果为TRUE,则继续进行下一步。这时,Deseq2会进行差异分析,并将结果汇总为diff对象。请将此结果导出保存,以便后续使用。

下一步是筛选出差异基因。使用Padj值(P值的矫正结果)与log2FC(基因表达量的差异倍数)进行筛选。通常,选择Padj值小于等于0.05(表示显著差异)的基因,并且根据log2FC判断基因的上调或下调表达。例如,log2FC为1表示基因在两种不同处理中的表达量相差了一倍,通常认为大于1为上调表达,少于-1为下调表达。

经过筛选后,导出并保存具有差异表达的基因列表(diffsig)。至此,差异表达分析基本完成。接下来,可以通过绘图进行可视化,以直观展示结果。虽然这里不再演示绘图步骤,但这一环节是分析的最后一步,能帮助你更好地理解数据。

示例数据与用于分析的代码已整理,如需获取请参考相应文章以获取更多详情。完成分析后,你将能够识别出在不同处理条件下表达量发生显著变化的基因,为后续生物学研究提供重要线索。
用deseq2如何筛选差异基因?

为了筛选差异基因,我们将使用Deseq2进行转录组分析。首先,确保你已经安装了RStudio,这是执行分析的必要环境。接下来,准备两个关键文件:基因表达量count数据以及样本信息文件。表达量数据应为每一行为一个基因,每一列为一个样本,而样本信息应包含样本名称与对应处理或类型。开始实操阶段,打开R,加载...

RStudio | 利用DESeq2包进行差异表达分析

启动R,导入R包以及数据。 验证基因表达量和样本信息是否匹配,匹配证明数据无误。 执行差异分析。得到的diff结果为总分析结果,导出保存。筛选差异基因,依据Padj值(矫正后P值)小于等于0.05(显著差异)和log2FC(表达量差异倍数)大于1或小于-1的标准。筛选后得到的diffsig为具有差异表达的基因,...

差异分析--DESeq2 包

核心的差异分析部分,DESeq会输出差异文件,通过P值和LogFC筛选出显著的差异基因。上调和下调的筛选细节,可以参考之前的推文。6.1章节中,为了便于可视化,通常会对Count值进行标准化,这里使用vst函数进行处理,然后绘制差异基因热图。小杜的生信笔记在多个平台上分享生物信息学教程,如简书、知乎和B站,涵...

差异分析魔法师:DESeq2与基因的魔幻冒险!

DESeq2的功能包括数据导入、预处理和差异分析。首先,确保在正确的目录下操作,并加载必要的R包。导入的数据通常是以特定格式存储,记得确保数据符合要求。接着,我们需要构建分组矩阵,区分癌症样本和正常样本,以便进行后续的分析。分析结束后,DESeq2会生成一些结果数据,我们可以将其可视化为火山图。通过...

DEseq2差异表达分析

一、DEseq2差异表达分析 1、安装 if (!requireNamespace("BiocManager", quietly = TRUE))install.packages("BiocManager")BiocManager::install("DESeq2")library(DESeq2)2、准备数据 featureCounts定量后的数据,或者FPKM数据(下一遍讲如何获取FPKM)定量后的数据的数据格式如下:colData,其实就是表型...

RNA-seq(7): DEseq2筛选差异表达基因并注释(bioMart)

并且WGCNA采取软阈值的方式来挑选genes更加合理。既然挑选差异表达基因,还是采取log2FC和padj来进行。结果显示如下:合并的话两个数据必须有共同的列名,我们先看一下 可见,两个文件没有共同的列名,所以要先给'diff_gene_deseq2'添加一个‘ensembl_gene_id’的列名,方法如下:(应该有更简便的方法)

DESeq2差异分析

DESeq2和EdgeR都可用于做基因差异表达分析,主要也是用于RNA-Seq数据,同样也可以处理类似的ChIP-Seq,shRNA以及质谱数据。这两个都属于R包,其相同点在于都是对count data数据进行处理,都是基于负二项分布模型。因此会发现,用两者处理同一组数据,最后在相同阈值下筛选出的大部分基因都是一样的,但是...

转录组入门(7):差异表达分析

导入数据,构建 DESeq2 所需的 DESeqDataSet 对象 注: 这一步到下一步之间可以过滤掉一些low count数据,节省内存,提高运行速度 使用DESeq 进行差异表达分析: DESeq 包含三步,estimation of size factors(estimateSizeFactors), estimation of dispersion(estimateDispersons), Negative Binomial GLM fitting and Wald...

生信工具推荐|差异分析的基本原理及工具使用解读

进行差异分析前,需要准备三个文件:基因count表格、组间比较文件和分组信息。分析参数包括检验值(P值或Q值)、检验阈值、差异倍数和离散系数(对于无重复样本,需要自行设定)。结果解读包括差异比较组的柱状图、差异分析结果表以及火山图,这些图表可以帮助你直观理解基因的表达变化。在使用omicshare tools进行...

理论| DESeq2 normalized counts -- Median of ratios method_百度...

以第一行基因的ratio为例,写出具体计算过程:由于大部分基因不会发生差异表达,所以样本内的ratios应是相当的。样本内(column-wise)所有比率的中值即为校正因子(normalization factor), 也就是DESeq2 的size factor 我们可以与 DESeq2 的sizefactor对比一下,看看我们算的是否正确 以上就是 DESeq2 ...

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