发布网友 发布时间:2024-10-01 10:04
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热心网友 时间:2024-12-02 17:58
嗅鞘细胞的分离技术有多种传统方法,其中最常见的是酶消化法。首先,将嗅球置于4℃的ACSF(人工脑脊液)中,通过解剖显微镜逐步剥离嗅神经层、嗅神经和脑膜。然后,用胰酶消化组织,再转移至含有DMEM和胎牛血清的培养液中,轻轻搅拌形成悬液。另一种方法是分层消化法,将嗅球整个浸泡在0.125%胰酶中消化,经过6次重复,收集细胞悬液。
另一种方法是免疫抗体包被、磁珠悬浮和流式细胞仪分离,利用OECs对p75NGFR的特异性。然而,这些方法产量较低,且操作复杂,耗时长,需要专用设备。相比之下,直接挤压法更简便,不需特殊仪器,且细胞获取量较多。在培养过程中,添加BPE可促进OECs增殖,但可能降低纯度。Arac纯化法经济且易于操作,OECs纯度可达70%,但进一步纯化如使用Thy-1.1抗体,虽然纯度高,但成本和复杂度增加。
总的来说,直接挤压法因其操作简便、效率高和产量较大而优于传统和分层消化法。在优化纯化策略时,需要权衡效果和成本。
嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)是在功能上介于施旺细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊的胶质细胞,具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘作用等。为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移的特性,使其成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。