这篇Cell 文章告诉你如何研究外泌体 miRNA
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发布时间:2024-09-25 16:15
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时间:2024-10-20 06:50
肥胖与2型糖尿病紧密相关,而研究发现,外泌体及其携带的miRNA在这一过程中扮演关键角色。加州大学的科研人员针对此问题进行了深入探讨。
首先,研究人员从肥胖小鼠的内脏脂肪组织中分离出脂肪组织巨噬细胞ATM,利用超速离心提取ATM细胞的外泌体,并通过电镜和NTA分析进行了进一步的纯化,以证实ATM细胞确实会分泌外泌体。
接着,通过Transwell小室实验和外泌体跟踪技术,以及外泌体分泌阻断实验,证明外泌体具有转运能力,能够从供体细胞释放并被受体细胞吸收。
在鉴定和验证外泌体功能后,研究人员将外泌体添加至细胞培养基中,或静脉注射到动物模型体内,以观察外泌体及其携带的miRNA对细胞和动物模型的影响。
高通量测序技术帮助研究者们在众多miRNA中,确定了在肥胖条件下,由ATM细胞分泌的外泌体miRNA对胰岛素应答的显著作用。此外,这一研究揭示了外泌体如何通过miRNA影响β细胞、干细胞或肌细胞的代谢。
综上,通过一系列实验,包括分离与鉴定外泌体、验证转运能力、影响分析和确定关键miRNA,本文揭示了肥胖引发慢性组织炎症与胰岛素抵抗和2型糖尿病之间的关联,以及外泌体及其携带的miRNA在此过程中的重要角色。这一研究为今后深入理解肥胖及其相关疾病提供了重要线索,并具有学习参考价值。