MS培养基注意事项
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发布时间:2024-09-26 08:17
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时间:2024-10-04 09:02
在配置MS培养基时,需要注意以下几点:
首先,母液Ⅱ和母液Ⅳ的制作过程如下:将所需成分精确称量后,用少量蒸馏水溶解,分别进行混合,最后调整总体积至1升。母液的配制过程中,对溶剂的纯净度和操作的精确度要求较高。
相比之下,母液Ⅲ的步骤更为细致。需将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别加入450毫升蒸馏水中,边加热边搅拌直至完全溶解。然后将两种溶液合并,并调整pH至5.5。这种母液需储存在棕色玻璃瓶中,以防止光线对成分的影响。
在MS培养基中,植物生长调节物质如2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)和6-苄基嘌呤(6BA)是必不可少的。这些物质需分别配制成1毫克/毫升的母液。具体步骤是,每种物质取10毫克,2,4-D和NAA用无水乙醇预溶,6BA则用0.1摩尔/升的NaOH溶液溶解,溶解时需在水浴中加热。最后,将溶液分别定容至100毫升。
培养基的选择对组织培养的成功与否至关重要。不同的植物种类和接种材料可能需要不同特性的培养基。在开始项目前,应详细研究和比较各种培养基,以便挑选出最适合的。通常,组织培养用的培养基包括基础培养基和激素,但具体激素的种类和浓度会根据培养阶段和材料的不同有所调整,因此在配方中不直接列出。常用的培养基除了MS培养基,还有B5培养基和N6培养基。