江汉区中细小病菌常见问题
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发布时间:2024-09-26 22:05
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时间:2024-10-22 09:36
也可等浓度混合包装;使用该试剂盒对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测时,将单一包装的标准品等浓度混合或直接使用混合包装的标准品。为方便检测,试剂盒中还可包括实施例2获得的标准曲线和说明书,该说明书内容包括pcr反应程序:实时荧光定量pcr反应条件为:反转录52℃15min;95℃2min;pcr扩增条件:95℃15s,56℃30s,45个循环。实施例5、疫苗生产过程中对疫苗半成品中抗原的实时荧光定量pcr检测使用实施例4的试剂盒对金宇保灵生物药品有限公司疫苗研究室提供的12份疫苗生产中半成品样品中抗原及其含量进行检测,检测方法与实施例2中步骤,待测样品编号为s1-s12,检测结果如下表5所示,可见本发明提供的对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测的试剂盒能够实现对疫苗生产中半成品样品中抗原的定性检测及其含量的定量检测,可为疫苗生产过程中质量监控和合理化配苗(如评估配制疫苗抗原的准确含量,为疫苗抗原含量提供数据基础)提供有力依据,江汉区中细小病菌常见问题,江汉区中细小病菌常见问题,确保疫苗接种的安全性和合理性。表5:12份疫苗生产中半成品样品的四重实时荧光定量pcr检测结果根据上表5的定量检测结果,拷贝数达到105的半成品样品可进行成品苗的配制。武汉动物诊所哪家好?江汉区中细小病菌常见问题
本发明属于生物检测技术领域:中的兽医动物病原检测,具体涉及一种用于犬腺bingii型、犬瘟热bing、犬细小bing和犬副流感bing的四重实时荧光定量pcr检测方法、检测试剂盒及其引物和taqman探针。背景技术::犬瘟热bing(caninedistempervirus,cdv)、犬细小bing(canineprvovirus,cpv)、犬副流感bing(canineparainfluenzavirus,cpiv)和犬腺bingii型(canineadenovirusii,cav-ii)是犬bing性传染病暴发和流行的主要病原体。cdv染上引起的犬瘟热主要有呼吸型、消化型、神经型和混合型4种,cdv染上可引起全身性的免疫压制,病死率极高。cpv主要引起犬的急性出血性胃肠炎和幼犬急性心肌炎。cpiv染上主要引起犬的呼吸道疾病,是犬传染性呼吸系统疾病重要的病原之一。cav-ii型引起与呼吸道疾病和肠炎相关的犬接触性呼吸道疾病,但不引起肺炎症状,可引起幼犬咳嗽又叫犬窝咳。这四种bing单一染上或混合染上均可给养犬业带来严重的打击,四种犬病原临床症状较为相似,且常伴有混合染上,给临床诊断造成了一定的困难。文献cna建立了用于同时检测犬瘟热bing、犬细小bing、i型和ii型犬腺bing的多重pcr检测引物。湖北治好细小病菌质量推荐武汉哪有好的宠物医院?
若待测样品在cpv-p的5’端所标记的荧光报告基团所对应的通道中的扩增曲线为标准的s型曲线,且ct值≤32,则结果判定为cpvbing阳性;若待测样品在cdv-p的5’端所标记的荧光报告基团所对应的通道中的扩增曲线为标准的s型曲线,且ct值≤32,则结果判定为cdvbing阳性;若待测样品在cav2-p的5’端所标记的荧光报告基团所对应的通道中的扩增曲线为标准的s型曲线,且ct值≤32,则结果判定为cav-iibing阳性;若待测样品32<ct值≤38,出现“s”型扩增曲线,则结果判定为可疑,该样品需要进行复检;若待测样品ct值>38,则结果判定为阴性;推荐地,若待测样品在hex通道中的扩增曲线为标准的s型曲线,且ct值≤32,则结果判定为cpivbing阳性;若待测样品在fam通道中的扩增曲线为标准的s型曲线,且ct值≤32,则结果判定为cpvbing阳性;若待测样品在cy5通道中的扩增曲线均为标准的s型曲线,且ct值≤32,则结果判定为cdvbing阳性;若待测样品在quasar705通道中的扩增曲线均为标准的s型曲线,且ct值≤32,则结果判定为cav-iibing阳性;若待测样品32<ct值≤38,出现“s”型扩增曲线,则结果判定为可疑,该样品需要进行复检;若待测样品ct值>38,则结果判定为阴性。
细小bing是一种无囊膜,单链,DNAbing。可通过较小的抗原转移与自然突变而染上犬科动物。犬细小病(CPV)毒病是由犬细小bing染上幼犬所引起的一种急性传染病。临床上有两种表现型,出血性肠炎型以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显赫减少为主要特征;心肌炎型则以突然死亡为特征。无论哪种类型的临床表现,均以发病率高、死亡率高和传染性强为特点1977年,美国学者Eugster和Nairn较早从患出血性肠炎的犬粪便中分离得到该bing,其后,加拿大、澳大利亚、法国、日本等国均有此病发生的报道。1982年,我国梁士哲等早报道了类似CPV(CanineParvovirus)所致的犬出血性肠炎;1983年,徐汉坤等正式确认本病的流行。犬细小bing的发现只有30年的时间,但该bing对犬的染上危害严重,世界各国对该bing生物学特性及其疫病的防制进行了大量的研究工作[1]细小bing属(Parvovirus),bing粒子无囊膜,CPV对外界的抵抗力较强,对酒精、乙chun、氯仿有抵抗性,对温度也有一定耐受性。65℃、30秒而不失其染上性,低温长期存放对其染上性并无明显影响。在4℃~10℃存活6个月,37℃存活2周,56℃存活24小时,80℃存活15秒,在室温下保存3个月染上性轻度下降。武汉哪有好的宠物医生?
第二,当犬群暴发本病后,应及时隔离,对犬舍和饲具,用2%~4%烧碱、1%*、0。5%过氧乙酸或5%~6%次氯酸钠反复消毒。
第三,适当用药,不要滥用抗生以及其他药:这段请大家务必仔细看
犬细小分为两种,一种会导致母狗难产,这种症状是大部分细小属的共同点,大部分细小都会造成宿主难产,死胎等。第二种为我们为常见的,分为肠炎型以及心肌炎型,心肌炎型多见于幼犬,幼犬发病率相当高,在10%上下,无明显症状,前期症状偶尔有呕吐,轻微腹泻等,但是突然发病身亡。本人养狗的时候,不幸碰到过心肌炎型,狗狗突然变得特别蔫,不吃东西,不喝水,而且拉稀,第二天突然好转,第三天早晨甚至可以吃东西,但是中午突然暴毙身亡。这是部分特征,参考用。细小非常详细的治方法。新洲区专业的细小病菌常见问题
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cdv的检测序列为cdvh基因5’端第1106-1253位碱基,序列表中sedidno:6所示;cpv的检测序列为cpvvp2基因5’端第642-828位碱基,序列表中sedidno:7所示;cpiv的检测序列为cpivnp基因5’端第49-216位碱基,序列表中sedidno:8所示。用,分别获得多组对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行实时荧光定量pcr检测的引物及taqman探针,以同时能对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行检测为目标,经过差异位点的分析比对,并通过交叉实验验证从中推荐能同时对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行实时荧光定量pcr检测的引物及taqman探针,确定序列如下:cav2-f(上游引物):5’-gatgtaaatgaccagtcctttgc-3’(序列表中sedidno:9)cav2-r(下游引物):5’-agtaggggtcgtaaggtgagc-3’(序列表中sedid0);cdv-f(上游引物):5’-agaaacaagaggagcaaaaaaactg-3’(序列表中sedid1)cdv-r(下游引物):5’-tcaatgcttggatctagaggtaatg-3’(序列表中sedid2);cpv-f(上游引物):5’-tgaacttgctacagggacatttt-3’(序列表中sedid3)cpv-r(下游引物):5’-atttcccatttgagttacaccac-3’(序列表中sedid4);cpiv-f(上游引物):5’-catatgagcgattcacactcactc-3’(序列表中sedid5)cpiv-r。江汉区中细小病菌常见问题
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