牛血清蛋白测定
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发布时间:2024-09-06 07:35
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时间:2024-10-05 13:30
在生物检测分析中,测定物质含量通常依赖于标准曲线,这是一种通过分光光度法建立的参考线。首先,你需要制作标准曲线,这一步骤对于后续的含量测定至关重要。以下是几种常见的测定方法:
1. 凯氏定氮法:这种方法用于测量样品中的氮含量,通过氮元素的含量间接推算出蛋白质的总量。
2. 双缩脲法:该方法利用双缩脲与蛋白质结合产生的特定颜色变化,通过比色法测量蛋白质含量。
3. Folin-酚试剂法:通过样品与Folin-酚试剂反应后,通过测定其氧化还原反应的强度,推算蛋白质的含量。
4. 紫外吸收法:利用蛋白质对特定波长光的吸收特性,通过测量光的吸收程度来确定蛋白质含量。
5. 考马斯亮蓝法:此法基于考马斯亮蓝染料对蛋白质的专一结合,通过染色后溶液的吸光度变化来计算蛋白质浓度。
每种方法都有其适用范围和特定的测定条件,选择合适的方法能确保测定结果的准确性。制作标准曲线并熟练掌握这些测定方法,是进行牛血清蛋白定量分析的基础技能。
扩展资料牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 kDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent。
牛血清白蛋白BSA:蛋白定量检测标准品
牛血清白蛋白(BSA)是牛血清中的一种主要白蛋白,由583个氨基酸残基构成,分子量约为66.43 kDa,等电点为4.7。它在实验室中有广泛应用,除在细胞培养中作为营养物外,还用于:1. 酶切反应体系的稳定剂,保护酶免受分解和非特异性吸附。2. 维持渗透压、提供pH缓冲和载体功能。3. 蛋白定量检测的...
牛血清蛋白测定
1. 凯氏定氮法:这种方法用于测量样品中的氮含量,通过氮元素的含量间接推算出蛋白质的总量。2. 双缩脲法:该方法利用双缩脲与蛋白质结合产生的特定颜色变化,通过比色法测量蛋白质含量。3. Folin-酚试剂法:通过样品与Folin-酚试剂反应后,通过测定其氧化还原反应的强度,推算蛋白质的含量。4. 紫外...
牛血清白蛋白的提取和鉴定方法(设计性实验报告)
牛血清白蛋白的提取操作步骤:1、盐析取离心管一支加入牛血清2mL、加入等量PBS(磷酸盐缓冲生理盐水)稀释血清,摇匀后,逐滴加入pH7.2饱和硫酸铵溶液2mL,边加边摇,充分混匀,然后静止放臵10分钟,再离心(2000r/min)10min,将上清液倾入试管中。2、取干净的比色板,在各孔内滴加一滴纳氏试剂...
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紫外分光光度法测定蛋白质含量
紫外分光光度法测定蛋白质含量实验方法如下:1、实验部分 仪器与试剂:LabtechUVPOWER紫外分光光度计;玻璃比色皿一套;考马斯亮蓝G250;牛血清蛋白;超纯水。试液的制备:牛血清蛋白标准溶液(1000ug/ml)的制备称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加入超纯水溶解并定容。考马斯亮兰G250试剂称取...
牛血清蛋白牛血清蛋白
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牛血清蛋白标准曲线制作
标准蛋白质溶液则是纯牛血清蛋白,通过测定蛋白氮含量后,按0.15mol/L NaCl配制成100ug/ml的溶液。实验中需要使用722S型分光光度计和移液管。制作标准曲线的步骤如下:在试管中,分别加入不同浓度的标准蛋白溶液(0-60ug/ml),再加入固定体积的0.15mol/L NaCl和考马斯亮蓝试剂,摇匀后静置1小时...
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