PCR基因扩增仪的原理+分类+操作+常见故障

发布网友发布时间：2024-08-26 16:16

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热心网友时间：2024-08-26 17:52

PCR技术原理在于体外进行核酸扩增。这一过程首先通过加热使双链DNA解开螺旋结构，然后在特定温度下使引物与模板DNA结合，随后在Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+和合适pH缓冲液的作用下，引物进行延伸。这一循环操作重复25～40次，使得样本中待测核酸拷贝数呈指数级增长。

PCR仪的分类主要有以下几种：

普通PCR仪仅支持一种退火温度，适用于对单一退火温度的目的基因进行扩增。梯度PCR仪则可设置一系列不同的退火温度，用于研究未知DNA的退火温度。原位PCR仪则结合了细胞定位能力，能在细胞内进行基因扩增，适用于在细胞特定位置进行基因扩增。

实时荧光定量PCR仪在PCR扩增时引入荧光标记，通过实时采集信号并分析处理，实现对扩增结果的定量输出。这类仪器分为金属板式、离心式和各孔独立控温的类型，分别具备不同的功能和特点。

普通PCR仪的操作相对简单，只需接通电源并设置程序。而实时荧光定量PCR仪的操作与普通PCR仪类似，但具体步骤可能略有不同。

PCR仪常见故障包括荧光染料污染、PCR管融化、扩增效率差异、荧光强度不稳定及仪器噪音。这些故障中，部分可以通过自我检查解决，其他则需专业工程师进行检修。