定性、定量、定位,WB、ELISA、IHC 三大免疫学实验,这一篇全搞定!_百度...
发布网友
发布时间:2024-09-04 23:31
我来回答
共1个回答
热心网友
时间:2024-09-06 12:27
在生命科学领域,免疫学实验是研究的核心,其中WB(Western blot)、ELISA(酶联免疫吸附试验)和IHC(免疫组化)三大工具扮演着关键角色。它们分别用于目的蛋白的定性、半定量和定位分析。本文将带你全面了解这三大技术的原理、操作流程,以及常见问题和解决策略。
WB,即蛋白质印迹,通过电泳分离和转移蛋白到膜上,利用抗体检测目标蛋白。它可以检测不同时期的蛋白表达和相互作用,但半定量性质需要注意背景和非特异性条带问题。针对常见问题,文章提供了详细的解决方案,包括处理高背景、信号弱和非特异性条带等。
ELISA则结合免疫学原理和化学显色,可以定性或定量检测抗原或抗体。有多种方法,如直接法、间接法等,双抗夹心法在大分子检测中更常用。实验流程包括样本处理、稀释、孵育、洗涤、显色和读数。