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DNA探针DNA探针原理

发布网友 发布时间:2024-08-11 03:39

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热心网友 时间:2024-08-11 04:22

DNA探针是一种关键的核酸探查工具,通常由几百对碱基构成的双链DNA或单链DNA构成。种类繁多,包括细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞的DNA。这些探针通常选取特定基因的全部或部分序列,或者是非编码序列,要求具有高度特异性,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。探针的制备得益于分子克隆技术的进步,特别是对细菌的研究,分子杂交技术的应用极大地提高了分类和鉴定的准确性,是细菌分类学领域的一个重要进展。


细菌基因组的大小大约为5×106bp,包含大约3000个基因。尽管不同细菌间大部分DNA相似,但获取特异的探针通常需要创建基因组DNA文库。首先,细菌DNA被切割并克隆,形成包含整个基因组信息的克隆库。然后,通过与其他细菌的DNA进行杂交筛选,剔除产生信号的克隆,保留不与其他细菌反应的克隆,这些可能含有特定细菌的特异性DNA片段。进一步标记的重组质粒作为探针,可用于鉴定基因来源和功能。


获取特异性DNA探针的过程可能相对复杂,需要精细的筛选和确认。另外,探针的克隆筛选也可以借助血清学方法,构建表达性DNA文库。通过释放表达抗原,然后用目标细菌的多克隆抗体进行筛选,最后通过与其他细菌抗体的反应,确定含有特定基因片段的克隆,其编码的蛋白是该菌种特有的。这种方法得到的是特定基因的探针,具有更高的特异性。


扩展资料

DNA探针是以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体。DNA探针将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针。可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。

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dna探针是什么

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基因探针的DNA探针

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DNA探针DNA探针原理

首先,细菌DNA被切割并克隆,形成包含整个基因组信息的克隆库。然后,通过与其他细菌的DNA进行杂交筛选,剔除产生信号的克隆,保留不与其他细菌反应的克隆,这些可能含有特定细菌的特异性DNA片段。进一步标记的重组质粒作为探针,可用于鉴定基因来源和功能。获取特异性DNA探针的过程可能相对复杂,需要精细的筛选和...

高中生物DNA探针含义是什么?运行原理?

1. DNA探针是一种核酸探针,通常由特异的DNA片段制成,长度可达数百至数千碱基对。2. DNA探针可以来源于细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞,它们通常是特定基因的全部或部分序列。3. 为了获得特异性,DNA探针需要通过分子克隆技术制备,这包括构建基因组DNA文库并筛选出与目标序列互补的克隆。4. ...

DNA探针技术如何实现特异性和敏感性检测?

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