CTABPVP法提取单叶省藤的RNA出出现的问题

发布网友 发布时间：2024-08-16 14:15

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热心网友 时间：2024-08-27 15:23

水浴过后为何要离心？水浴过后我们一般是加入氯仿异戊醇混匀冰浴10min后再离心取上清。之后我觉得你就不用再氯仿异戊醇了。直接用LiCl沉淀。沉淀的时候我们好像还加入一点pH4.0左右的NaAc。再加入SSTE是什么意思呢？二次裂解释放RNA么？我觉得你LiCl沉淀过夜之后就可以用SSTE溶解沉淀了。一般LiCl沉淀的话我们也是-20度，然后离心之前放-70度半个小时效果会好一些。如果你舍弃了之前的氯仿异戊醇，觉得你可以在加SSTE之后的酚仿和氯仿异戊醇再各加一次。最后干燥的时候也需要注意，尽量吸干水分，比较容易干燥。冬天天气还好，平时干燥要小心。我觉得步骤也是能减少就减少，看过很多RNA提取的步骤，但是觉得你的步骤太过繁琐，是否在过程中拖延的太久，也会造成降解。
另外就是你的操作，我觉得操作也需要小心。
我是参照这个方法做的，我提的是茶树叶片的。《提取高质量茶树总RNA的方法研究》。祝你好运。

热心网友 时间：2024-08-27 15:27

你的样品是直接放到10ml管里面的么？为什么不用液氮磨碎？

你整个过程花费多少时间?

电泳时电泳液换新的。

你的过程没什么问题，出现降解应该就是操作过程中出现的。多做几次。是在不行换trnzol。

热心网友 时间：2024-08-27 15:25

水浴过后为何要离心？水浴过后我们一般是加入氯仿异戊醇混匀冰浴10min后再离心取上清。之后我觉得你就不用再氯仿异戊醇了。直接用LiCl沉淀。沉淀的时候我们好像还加入一点pH4.0左右的NaAc。再加入SSTE是什么意思呢？二次裂解释放RNA么？我觉得你LiCl沉淀过夜之后就可以用SSTE溶解沉淀了。一般LiCl沉淀的话我们也是-20度，然后离心之前放-70度半个小时效果会好一些。如果你舍弃了之前的氯仿异戊醇，觉得你可以在加SSTE之后的酚仿和氯仿异戊醇再各加一次。最后干燥的时候也需要注意，尽量吸干水分，比较容易干燥。冬天天气还好，平时干燥要小心。我觉得步骤也是能减少就减少，看过很多RNA提取的步骤，但是觉得你的步骤太过繁琐，是否在过程中拖延的太久，也会造成降解。
另外就是你的操作，我觉得操作也需要小心。
我是参照这个方法做的，我提的是茶树叶片的。《提取高质量茶树总RNA的方法研究》。祝你好运。

热心网友 时间：2024-08-27 15:27

你的样品是直接放到10ml管里面的么？为什么不用液氮磨碎？

你整个过程花费多少时间?

电泳时电泳液换新的。

你的过程没什么问题，出现降解应该就是操作过程中出现的。多做几次。是在不行换trnzol。