滤纸培养基的做法

发布网友发布时间：2024-09-17 01:02

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热心网友时间：2024-11-05 15:09

培养基配制一般过程：
1．称量按培养基配方依次准确称取各成分于烧杯中。
2．溶化在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，放石棉网上加热，用玻棒搅匀，待药品完全溶解后再补充水分到所需量。若配制固体培养基，将称好的琼脂加入已溶化的药品中，再加热融化。
3. 调pH 先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值。若偏酸，可用滴管逐滴加入1 mol／L NaOH，边加边搅拌，随时用pH试纸检测，直至pH达到所需范围。若偏碱，则用1 mol／L HCl进行调节。pH值不要调过头，以避免回调而影响培养基内各离子浓度。
4. 过滤趁热过滤。液体培养即可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布过滤，以利结果的观察。供一般使用的培养基，无特殊要求，这步可省略。
5. 分装按实验要求将配制好的培养基趁热分装于试管或三角瓶内，不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
分装量：液体培养基分装高度以试管高度的1／4为宜，三角瓶不超过容积的一半。固体培养基不超过管高的1／5，灭菌后制成斜面；三角瓶不超过容积的一半。半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
6．加棉塞培养基分装完毕，在试管口或三角瓶口塞上棉塞(或泡沫塑料塞及试管帽等)，以防止外界微生物进人培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
7．包扎加塞后在三角瓶或试管(试管须先扎成捆)外包一层牛皮纸或双层报纸，用一道绳扎好，以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期等。
8. 灭菌将包扎好的培养基按各自所需的灭菌时间和温度进行高压蒸汽灭菌或其他方法灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌，则应放人冰箱内作短期保存。
9．搁置斜面灭菌后，冷至50。C左右(以防斜面上冷凝水太多)，趁热将试管口搁在一根玻棒或长木条上，调整斜度，使斜面长度不超过试管总长的一半。
1 0．无菌检查将灭菌培养基放人37℃温箱中培养24～28 h，以检查灭菌是否彻底。