琼脂扩散试验原理
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发布时间：2024-09-07 04:03
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时间：2024-09-29 03:00
琼脂扩散试验原理在于将可溶性抗原与相应抗体在琼脂糖凝胶中自由扩散相遇，形成抗原抗体复合物。复合物分子量增大并产生聚集，不再继续扩散，形成肉眼可见的带状或线状沉淀带。这些沉淀带具有特异性半渗透性屏障，可阻止免疫学性质相似的抗原抗体分子通过，但允许性质不相似的分子继续扩散。通过观察不同抗原或不同抗体形成的沉淀带位置，可以实现混合系统的分离和鉴定。利用琼脂糖凝胶作为扩散介质，是因为其多孔网状结构和大孔径允许大分子物质自由通过。大多数抗原和抗体的分子量都在20万以上，因此在琼脂糖凝胶中几乎可以自由扩散。此外，琼脂糖凝胶具有良好的化学稳定性和透明度，来源方便且处理容易，使其成为免疫沉淀检测技术中最理想的扩散介质。
琼脂扩散试验的实施方法多样，既可在试管内进行，亦可在平皿或玻片上的琼脂中进行。根据试验目的和应用，琼脂扩散试验又可分为单向琼脂扩散试验和双向琼脂扩散试验两类。单向琼脂扩散试验仅使用一种抗原，而双向琼脂扩散试验则使用两种抗原，通过比较两种抗原的沉淀反应情况，有助于鉴定抗体的特异性。
综上所述，琼脂扩散试验是一种基于抗原抗体特异性结合原理的检测方法，通过在琼脂糖凝胶中观察抗原抗体复合物形成的沉淀带，实现对混合系统的分离和鉴定。其独特的实验设计和选择性，使得琼脂扩散试验在免疫学研究和临床诊断领域发挥着重要作用。
扩展资料
单向琼脂扩散试验 是一种常用的定量检测抗原的方法。将适量稀释后的抗体与等量琼脂混匀，浇注成板，凝固后，在板上打孔，孔径3mm，孔间距10mm，孔中加入抗原，每孔10μL，放置湿盒中，37℃温箱，抗原就会向孔的四周扩散，边扩散边与琼脂中的抗体结合。24h－48h后观察结果，在两者比例适当处形成白色沉淀环。沉淀环的直径与抗原的浓度成正比。如事先用不同浓度的标准抗原制成标准曲线，则从曲线中可求出标本中抗原的含量。本试验主要用于检测标本中各种免疫球蛋白和血清中各种补体成分的含量，敏感性很高。
