DC2.4细胞培养,一种永生化的小鼠树突状细胞培养攻略-丰晖生物
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发布时间:2024-09-08 15:37
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时间:2024-09-15 20:55
DC2.4细胞,一种永生化的树突状细胞,通过将含有GM-CSF和myc、raf致癌基因的逆转录病毒载体转导至C57BL/6小鼠的骨髓分离物产生。树突状细胞,免疫系统的抗原呈递细胞,广泛存在于组织中,特别是与外部环境接触的组织。首次发现于1973年,DC的主要功能包括吞噬外来病原体,将加工后的抗原呈递给T细胞,调节适应性免疫反应。尽管DC分布广泛,但数量有限,体外培养困难,限制了研究。DC2.4细胞保持树突状细胞的特征,形态、标记物表达正常,用于研究树突状细胞的生物学、炎症和免疫反应。
DC2.4呈不规则多边形,有突起,贴壁生长。未成熟时,能吞噬外源抗原,抗原经加工,通过MHCⅡ分子呈递给T细胞,刺激T细胞增殖与分化,激发炎症。DC2.4的抗原呈递能力增强,摄取、加工抗原能力减弱,最终成熟。文献显示,DC2.4的活化与成熟可通过多种途径,如脂多糖(LPS)。成熟过程中,共刺激分子CD86表达上调,是DC2.4成熟标志之一。
本库种属鉴定结果准确,支原体检测呈阴性。DC2.4细胞培养推荐使用RPMI-1640培养基,含10%胎牛血清,在37度、5% CO2的培养箱中进行。建议每周2-3次更换新鲜培养基,按照1:3至1:5的比例进行传代,室温下用胰酶消化1-2分钟。
总结:
1. DC2.4细胞为不规则多边形,有突起,贴壁生长,适合研究树突状细胞的生物学、炎症和免疫反应。
2. 使用RPMI-1640培养基,含10%胎牛血清,在37度、5% CO2的培养箱中培养。
3. 传代推荐比例为1:3至1:5,传代周期为2-3天。