发布网友 发布时间:2022-05-09 14:51
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热心网友 时间:2023-10-03 01:05
水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时。2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟。3、12000转/分钟离心10分钟,取上清,-20摄氏度保存备用。操作最简便,对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。有人称扩增4kb以下片段都可用此种方法制取模版,编者用此类模板PCR可以扩增到3500bp的片段。编者建议:此法得到的模版保存时间短,强烈建议每月重新制作一次。