求怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量
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发布时间：2024-10-13 12:05
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时间：2024-10-13 16:05
2. 核酸在280nm和260nm处的吸收差异可用于测定蛋白质含量。核酸在280nm处的吸收比蛋白质强10倍（每克），但其在260nm处的吸收更强，其吸收峰位于260nm附近。核酸在260nm处的消光系数是280nm处的两倍，而蛋白质的情况则相反，其280nm的紫外吸收值通常大于260nm的吸收值。
3. 当蛋白质溶液浓度较低，不能使用280nm的光吸收法进行测定时，可采用215nm与225nm的吸收差法。通过标准曲线法，可以测定蛋白质稀溶液的浓度。
4. 肽键测定法利用蛋白质溶液在238nm处的光吸收与肽键含量成正比的关系。可以配制一系列已知浓度（50～500 mg/mL）的标准蛋白质溶液，测定其在238nm的光吸收值A238。以A238为纵坐标，蛋白质含量为横坐标，绘制标准曲线。通过标准曲线，可以求得未知样品的蛋白质浓度。
紫外分光光度法是一种重要的光谱分析技术，通过测定物质在特定波长处的吸光度或发光强度，用于物质的定性和定量分析。常用的紫外分光光度法包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。紫外-可见分光光度法在190～800nm波长范围内用于鉴别、杂质检查和定量测定。
