荧光域值的缺损设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍...
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发布时间：2024-10-12 07:26
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时间：2024-10-14 01:17
这是因为DNA复制量未达到仪器检测到的水平，但实际PCR循环却真实进行，反映在仪器曲线上为基线，直到量变达到质变时，才会被仪器检测到，变成指数增长期。
一般把荧光PCR的前15个循环信号作为荧光本底信号（baseline，基线期），即样本的荧光背景值和阴性对照的荧光值，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖。
荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上，荧光域值的缺省设置是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍（机器自动设置）。
在做荧光定量PCR实验时，经常采用手动设置，手动设置的原则要大于样本的荧光背景值和阴性对照的荧光最高值，同时要尽量选择进入指数期的最初阶段，真正的信号是荧光信号超过域值。
扩展资料：
PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号，荧光阈值的（默认）设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍，即：threshold = 10*SDcycle 3-15
Ct值与起始模板的关系
每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，公式如下。
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)
n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。
参考资料来源：百度百科-循环阈值
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时间：2024-10-14 01:11
