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单克隆抗体鉴定实验

发布网友 发布时间:1天前

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热心网友 时间:2024-10-03 22:23

在单克隆抗体鉴定实验中,首先对杂交瘤细胞的染色体进行检查,通常采用秋水仙素裂解法。制备完成的单克隆抗体需要进一步测定其类型和亚型。这一过程涉及购买特定的标准抗血清,如兔抗小鼠Ig类型和亚型的,常用的检测方法包括琼脂扩散法和ELISA夹心法。


ELISA夹心法是常用的一种测定方法,它基于双抗体夹心原理。通过小鼠抗体的二抗包被微孔板,与单克隆抗体进行结合,然后加入HRP标记的抗小鼠Ig类、亚类抗体进行反应。显色后,通过TMB底物系统和酶标仪测定吸光度,判断单克隆抗体的类别或亚型。该试剂盒具有高分辨率,是鉴定小鼠单克隆抗体类和亚类的可靠工具。


实验步骤包括恢复试剂至室温,配置清洗液,准备样本和阳性对照,加入细胞培养上清或纯化的抗体进行孵育。随后进行多次洗涤,加入酶标二抗和显色剂进行进一步反应,肉眼观察或借助酶标仪测量结果。该试剂盒具有高灵敏度和特异性,结果判定直观。


单克隆抗体的特异性鉴定可以通过多种技术,如免疫荧光法、ELISA法、间接血凝和免疫印迹技术,以及免疫阻断试验来确保其特异性。效价测定方面,可采用凝集反应、ELISA或放射免疫测定,腹水样本的效价通常高于培养上清。亲和力和识别抗原表位的能力也是单抗鉴定的重要指标。




扩展资料

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单克隆抗体鉴定实验

在单克隆抗体鉴定实验中,首先对杂交瘤细胞的染色体进行检查,通常采用秋水仙素裂解法。制备完成的单克隆抗体需要进一步测定其类型和亚型。这一过程涉及购买特定的标准抗血清,如兔抗小鼠Ig类型和亚型的,常用的检测方法包括琼脂扩散法和ELISA夹心法。ELISA夹心法是常用的一种测定方法,它基于双抗体夹心原理。...

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单克隆抗体

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