我做的是分子鉴定真菌,用的是通用引物ITS1和ITS4,pcr扩增后只有marker有条带,其他的都没有是什么原因。
发布网友
发布时间:2022-05-10 21:52
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热心网友
时间:2023-11-04 23:20
原因很多,你是否提到了DNA,可以将你跑的DNA直接跑胶看看,到底有没有条带;
PCR扩增的程序有没有问题,或者引物是否有问题,可以找个对照DNA试试,相同扩增条件下,是否扩出条带,如果扩不出来就用可能是引物的问题,其次是引物的退火温度,很重要,直接影响条带有无和条带亮度。
ITS1和ITS4是真菌的通用引物,一般是不存在引物设计问题的。
热心网友
时间:2023-11-04 23:20
呵呵 我最近扩真菌也是这样 我的二聚体很亮
同样的条件以前p出来过 现在p不出来啦
热心网友
时间:2023-11-04 23:21
增加模板浓度试试
热心网友
时间:2023-11-04 23:21
你说的太笼统了。
最大可能是引物设计的问题。