DNA粗提取与鉴定实验的各种试剂及用途

发布网友发布时间：2022-05-18 15:38

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热心网友时间：2023-10-19 03:14

1.鸡血细胞液；预冷的95%的酒精溶液；蒸馏水；质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液；物质的量浓度分别为2 mol/L 和0.015 mol/L的氯化钠溶液；二苯胺试剂。2.（1）应用低渗原理和机械搅拌使细胞破裂并过滤。本步骤直接决定提取的核物质的多少及实验结果。（2）溶解细胞核内DNA。加2 mol/L的NaCl溶液并用玻棒搅拌。（3）析出DNA黏稠物并过滤。注意①注蒸馏水要慢，防过量而使DNA重新溶解（把握浓度达0.14 mol/L）。②轻轻沿同一方向搅拌，有利于DNA析出、附着、缠绕。（4）再溶解DNA黏稠物并过滤。用浓度为2 mol/L的NaCl溶液。（5）提取含杂质较少的DNA。用预冷的95%的酒精。因其①可抑制核酸水解酶活性，防止降解。②降低分子运动，易析出沉淀。③低温利于增加DNA柔韧性，减少断裂3．DNA鉴定。用二苯胺在沸水浴中与DNA作用出现蓝色。

热心网友时间：2023-10-19 03:14

粗提浓度较高的氯化钠溶液 95%冷酒精蒸馏水一般是用鸡血来提取DNA浓度较高的氯化钠溶液(大概物质的量浓度为2 moL/L )中,核蛋白容易解聚,游离出DNA。而DNA在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高,Na+与带负电的DNA结合成DNA钠盐。这时DNA在溶液中呈溶解状态。
加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。利用DNA在浓度较低的氯化钠溶液中溶解度小的原理,向含有DNA的浓度较高的氯化钠溶液中加入大量蒸馏水,稀释氯化钠溶液,使DNA的溶解度下降,而蛋白质的溶解度增高从而使二者分离。将含有Na+的DNA溶液,加入到相当于其两倍体积的体积分数为95%冷酒精溶液中,混匀以后可以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮于溶液中。鉴定甲基绿甲基绿见DNA会给它染上绿色就可以鉴定出是DNA