发布网友 发布时间:2022-05-18 02:40
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热心网友 时间:2023-10-06 06:11
基于RNA介导的CRISPR/Cas9基因组编辑技术,已经在多种生物中快速实现精准的基因位点编辑。与CRISPR/CAS9方法类似,已有方法可以实现RNA水平的碱基编辑以及内源RNA的转录成像,但是这些方法均依赖于外源基因探针的整合。在本课题中,作者发现了不具有核苷酸酶活性的CRISPR/Cas9,可以结合RNA并在活细胞体内示踪RNA。该酶被命名为RCas9,在靶向mRNA的sgRNAs存在条件下,可以从细胞核转运至细胞质。借助这一工具,作者观察了编码ACTB、CCNA2和TFRC的mRNAs的在RNA颗粒中的聚集,这一现象与免疫原位杂交的结果一致。此外,随着时间的变化,可以观察到ACTB的mRNA向应激颗粒的转运过程。综上,作者发现了一种利用RCas9示踪活细胞体内RNA的技术。