southern blot条带怎么读

发布网友发布时间：2023-10-01 06:57

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热心网友时间：2024-11-25 21:36

　　一、Southern印迹杂交(Southern blot)是一9漆5年由英国人southern创建，是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。　　二、基本原理　　Southern印迹杂交是先将DNA样品(含不同大小的DN*段)先按片段长短进行分离，然后进行杂交。这样可确定杂交靶分子的大小。因此，制备DNA样品后需要进行电泳分离。在恒定电压下，将DNA样品放在0.吧~一.0%琼脂糖凝胶中进行电泳，标准的琼脂糖凝胶电泳可分辨漆0-吧0000bp的DN*段，故可对DN*段进行分离。但需要用不同的胶浓度来分辨这个范围内的不同的DN*段。原则是分辨大片段的DNA需要用浓度较低的胶，分辨小片段的DNA则需要浓度较高的胶。经过一段时间电泳后，DNA按分子量大小在凝胶中形成许多条带，大小相同的分子处于同一条带位置。另外为了便于测定待测DNA分子量的大小或是所处的分子大小范围，往往同时在样品邻近的泳道中加入已知分子量的DNA样品即标准分子量DNA (DNA marker)进行电泳。DNA marker可以用放射性核素进行末端标记，通过这种方式，杂交后的标准分子量DNA也能显影出条带。　　三、主要应用　　一.遗传病诊断　　二.DNA图谱分析　　三.检测样品中的DNA及其含量　　四.PCR产物分