发布网友 发布时间:2023-10-01 15:01
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热心网友 时间:2024-01-23 00:12
elisa技术的原理及应用如下:
ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种免疫分析技术,其基本原理是利用抗原-抗体反应的特异性,通过酶与底物反应的放大效应,检测样本中的微量抗原。
在ELISA技术中,首先将抗原或抗体固相化在反应板中。当加入待测样本时,样本中的抗原或抗体与固相化的抗原或抗体特异性结合。未结合的成分被洗涤去除,接着加入酶标记的二抗,与固相化的抗体或抗原结合。未结合的酶标记物通过洗涤去除,最后加入底物,底物在酶的作用下发生颜色反应,颜色深浅与待测物的浓度成正比。
ELISA技术广泛应用于生物学和医学领域,例如感染性疾病的诊断、生物分子量的测定、抗体效价的测定、药代动力学研究等。在临床检验中,ELISA主要用于检测血清、血浆、尿液等生物样品中的特定抗原或抗体,如肿瘤标志物、病毒抗体、药物等。
ELISA具有较高的灵敏度和特异性,且操作简便、结果稳定。其检测限通常在ng至pg级别,对于大多数蛋白质抗原,其灵敏度可达到1pg/ml。此外,ELISA还可以用于研究免疫学和生物化学过程,如细胞因子的测定、肿瘤细胞的免疫学鉴定等。
然而,ELISA也有其局限性,如操作繁琐、耗时长、成本较高,且对实验条件和操作人员技能要求较高。因此,不断改进和优化ELISA技术是提高其应用效率和降低成本的关键。