哪种荧光技术的轴向分辨率为500nm
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发布时间：2023-09-11 20:00
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时间：2024-10-27 02:34
操作步骤
1.用二甲苯浸洗2每5min；
2.用梯度乙醇（100、95、90、80、70％）各浸洗1每3min；
3.PBS漂洗2；
4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 21–37°C或者加细胞通透液8min；
5.PBS漂洗2；
6.制备TUNEL反应混合液处理组用50μl TdT＋450μl 荧光素标记dUTP液混匀；阴性照组仅加50μl 荧光素标记dUTP液阳性照组先加入100μl DNase 1反应室温～37℃×10～30min面步骤同处理组
7. 玻片干加50μl TUNEL反应混合液（阴性照组仅加50μl 荧光素标记dUTP液）于标本加盖玻片或封口膜暗湿盒反应37℃×60min
8.PBS漂洗3；
9.加1滴PBS荧光显微镜计数凋亡细胞（激发光波450～500nm检测波515～565nm）；
10.玻片干加50μl converter-POD于标本加盖玻片或封口膜暗湿盒反应37℃×30min
11.PBS漂洗3；
12.组织处加50～100μlDAB底物反应15～25℃×10min；
13.PBS漂洗3；
14.拍照再用苏木素或甲基绿复染几秒立即用自水冲洗梯度酒精脱水、二甲苯透明、性树胶封片
15.加滴PBS或甘油视野用光显微镜进行计数（200～500细胞）并拍照
