10鼻笾ELISA显色液TMB的应该加多少

发布网友发布时间：2023-10-15 16:46

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热心网友时间：2024-07-30 18:03

包被100 ul，你的反应体系应该就是100 ul。除了封闭用150 ul，其余所有包括TMB都用100 ul没有问题。终止液可以只加50 ul，2M的硫酸足够强了。看你OD值下降了，主要原因应该就是抗原和二抗的量都加少了。由于有封闭这一步，你不用担心气泡带着抗原超过了100 ul体系，只要不超过150 ul就可以（当然对于好的移液*操作，不应该造成气泡）。
TMB是HRP的底物，自己不能显色，但随着反应时间延长，显色是会加深，根据自己实际反应来控制反应时间，不用管别人推荐的时间。反应时间主要看阳性对照的OD值，即不能太长，使得阳性对照超出了仪器检测范围，或实验组将底物全部反应完（通常底物是过量的），造成实验组无差别；也不能太短，造成检测灵敏度下降。

10鼻笾ELISA显色液TMB的应该加多少

终止液可以只加50 ul，2M的硫酸足够强了。看你OD值下降了，主要原因应该就是抗原和二抗的量都加少了。由于有封闭这一步，你不用担心气泡带着抗原超过了100 ul体系，只要不超过150 ul就可以（当然对于好的移液枪操作，不应该造成气泡）。TMB是HRP的底物，自己不能显色，但随着反应时间延长，显色是...

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