western blot的抗体可以用来做co-ip吗11

买抗体之前，需要了解该抗体的应用范围，即查看说明书，上面写明了WB、IP，那就是既可以做WB也可以做IP，如果只写了WB，那就不能做IP。最重要的原因是WB是变性后蛋白检测，蛋白已经没有高级结构，抗体结合的表位很可能是蛋白内部的线性表位，而IP是未变性蛋白的沉淀，蛋白拥有高级结构，抗体结合的是空...

蛋白互作研究中，免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）是一项基础且重要的技术，它依赖于抗体与抗原之间的特异性结合，以揭示蛋白质之间的相互作用。其核心原理是利用预先固定在琼脂糖珠子上的抗体，通过与目标蛋白A结合，将与其在细胞内结合的蛋白B一同沉淀下来。通过后续的western blot技术检测B蛋白...

免疫共沉淀(Co-IP)技术是研究蛋白质间相互作用的有效工具，用于确定和证实蛋白质复合体中的特定相互作用。它的理论基础类似于免疫沉淀(Immunoprecipitation)原理，是利用抗体与细胞内的特定蛋白质结合，并通过蛋白A或G支持物吸附，同时捕捉到与该特定蛋白有相互作用的其他蛋白质。沉淀过程后，通过Western Blot...

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是一种研究蛋白质相互作用的经典方法，基于抗体和抗原之间的专一性作用。该技术适用于确定两种蛋白质在完整细胞中的生理性相互作用，常用于测定两种目标蛋白质是否在体内存在相互作用。实验原理在于，在非变性条件下裂解细胞时，蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留。使用蛋白质...

沉淀物通过蛋白变性分离后，利用Western Blot或MS质谱分析，验证了X和Y蛋白间的相互作用。琼脂糖珠作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用材料，其海绵状结构可以高效结合抗体，从而捕获靶蛋白。然而，抗体量不足可能导致非特异性结合，为此，预处理方法可有效解决此问题。相比之下，磁珠直径更小，单位体积内...

结果解读：通过观察Co-IP实验结果图，结合实验步骤进行分析。比如，通过分析条带的位置和大小，可以判断蛋白间是否存在相互作用。条带的出现或消失可以揭示蛋白间相互作用的模式。实验技巧：设置正确的对照实验，以确保结果的真实性。避免假阳性结果的出现，可通过阴性对照、阳性对照和output组的设置来实现。

IP&Co-IP实验原理基于抗体特异性反应纯化特定蛋白。在IP实验中，抗体与细胞裂解液中的目标蛋白结合后，通过ProteinA/G抗体复合物沉淀下来，最后通过SDS-PAGE或Western Blot分析沉淀的蛋白。Co-IP操作流程包括实验组、对照组的设置，关键在于抗体的选择、使用比例以及琼脂糖珠或磁珠的选择。实验组需包括磁珠...

实验原理：在非变性条件下，细胞被裂解，使用目标蛋白抗体可以捕获目标蛋白及其结合的蛋白质。通过离心沉淀，冲洗掉未结合的蛋白，使用Western blot（WB）或免疫印迹（IB）检测沉淀蛋白中目标蛋白和其结合蛋白的量，从而揭示目标蛋白与其结合蛋白之间的相互作用。Co-IP实验常用于验证已知蛋白之间的相互作用。若...

免疫共沉淀（CO-IP）一、基础资料 CO-IP是基于抗体与抗原特异性结合，以及“Protein A/G”结合抗体FC段的原理，用于研究蛋白质复合体间的相互作用。二、主要步骤 试剂准备，细胞处理，抗体结合，抗原抗体复合物沉淀，清洗，上样，煮沸，电泳分析。三、实验解疑 1. 抗原未沉淀：确认抗原量、抗体特异性...

Co-IP实验涉及以下步骤：首先，以细胞内源性靶蛋白为诱饵，使用特异性识别靶蛋白的抗体与细胞总蛋白共孵育以形成免疫复合物；随后，加入蛋白A/G（预先结合在琼脂糖凝胶或磁珠上）以捕获与靶蛋白有相互作用的蛋白，形成复合物。通过凝胶电泳分离纯化后，应用Western blot或质谱技术鉴定目标蛋白的结合蛋白或...