ti质粒要有限制酶

（1）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位，所以要构建重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割，然后再用DNA连接酶连接．（2）A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被...

大肠杆菌质粒裂解系统是一种常用的生物技术工具，用于从大肠杆菌细胞中提取质粒DNA。该系统利用特定的化学物质或酶，破坏大肠杆菌细胞的细胞壁和细胞膜，使质粒DNA得以释放。随后，通过离心和纯化步骤，可以从裂解物中分离出高质量的质粒DNA。这一过程对于基因工程、分子生物学和生物技术等领域的研究至关重要，因为它允许科学家们在体外操作、复制和编辑DNA，以推动科学研究和技术创新。利穗科技（苏州）有限公司于2009年在苏州生物纳米园成立，为国家高新技术企业。目前，利穗拥有45000平米的生产基地及3500平米的应用开发实验中心，员工人数超过450人。利穗是生物制药行业下游纯化设备制造商和工程解决方案提供商，服务超过1000...

改造Ti质粒是为了去除其上的限制，如过大的分子尺寸、限制酶位点和干扰植物激素平衡的基因，加入大肠杆菌复制起点和选择标记，以便于外源基因的克隆和筛选。科学家们通过构建中间载体，如插入T-DNA片段的穿梭质粒，解决直接导入问题，最后结合受体Ti质粒，形成基因转化载体，如一元载体和双元载体，通过Ti质粒...

但是，这个区所含的基因还能够决定肿瘤的形成和抑制植物细胞分化，此外还因为存在多种限制酶的多个切点，造成体外重组DNA操作困难，因此，Ti质粒在重组DNA的实用技术中往往需要加以改造。目前已经以Ti质粒为基础，构建了许多新的载体，如PGV-3850，PMON128，PTIB6S3(SEV系统)等。Ti质粒长期以来被认为只能进...

与运载体结合用到了限制酶和DNA连接酶。利用ti质粒构建重组质粒的目的，酪蛋白基因与Ti质粒结合构成重组质粒，目的基因与运载体结合用到了限制酶和DNA连接酶。

因为要让目的基因进入细胞，必须要让它借助工具进去，而且需满足目的基因可以在里面可以转录翻译复制，达到目的，那么质粒就是一个很好的运输工具。质粒：细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。

农杆菌有Ti质粒，Ti质粒上有一段T-DNA。目的基因插入Ti质粒上的T-DNA中，导入农杆菌，让农杆菌侵染植物，农杆菌的Ti质粒上的T-DNA片段（内有目的基因）与植物细胞的染色体DNA发生同源重组交换即可。

（7）在基因工程中，需要将目的基因与运载体结合后才能导入受体细胞．对于植物而来可以将目的基因导入植物的体细胞中，然后通过组织培养技术获得抗虫棉；同时也可将目的基因导入受精卵中．故答案为：（1）从细胞中分离???化学方法人工合成???Ti质粒 （2）限制性内切酶（限制酶）???A （3）重组DNA分子...

Ti 质粒是植物基因工程的一种天然载体。但野生型Ti 质粒不能直接用作克隆外源基因的载体。这主要表现在:①野生型Ti 质粒分子过大,因而在基因工程中操作起来十分麻烦;②野生型Ti 质粒上分布着各种限制型核酸内切酶的多个酶切位点,不论用何种限制型核酸内切酶切割,都会切成很大片段。而且即使在T-DNA 上也很难找到可...

【答案】：首先把原有的天然Ti质粒进行改造，即①切除致瘤基因，有利于组织培养和植株再生；②增加能引入外源基因的单一限制酶切位点；③插入选择性标记基因，通常采用抗菌素抗性标记；④装配一个高效启动子，通常可用植物核基因或T-DNA上的章鱼碱和胭脂碱合成酶基因启动子；⑤组建一个植物基因或T-DNA的...

一般载体所具备的基本条件为：1、能自我复制，并具有一定的拷贝数；2、带有抗性基因，便于筛选和鉴定；3、在适当的位置有单酶切位点；4、带有强启动子，驱动目的基因在宿主细胞内高效表达。Ti质粒是诱导植物肿瘤的质粒，其结果中的可转移DNA（T-DNA）顺序有促进Ti质粒转移至植物细胞染色体DNA（cDNA）中...