生物化学实验关于蛋白质检测
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发布时间：2022-04-24 20:12
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热心网友
时间：2023-10-09 13:00
实际上，凡分子内含有两个氨甲酰基（－CO－NH2)的化合物，不论是直接相连或是通过一个氮或碳原子间接连接；以及具有一CS－NH2，一C(NH)NH2，－CRH－NH2，－CH2NH－CHNH2CH2OH，－CHOH－CH2NH2等基团的化合物均能产生双缩脲反应；甚至过量的铵盐也会干扰反应。所以，双缩脲反应并非为蛋白质所特有。
【实验试剂和器材】
1．试剂
⑴ 10% NaOH溶液。
⑵ 双缩脲试剂：称取硫酸铜（cupric sulfate，CuSO4•5H2O，A.R.或C.P.)1.50 g，酒石酸钾钠（potassium sodium tartrate，NaKC4H4O6•4H2O，A.R.或C.P.)6.0 g，分别用蒸馏水约250 mL溶解后，全部转移于1 L容量瓶中，混合；再加入10% NaOH溶液300 mL，随加随摇匀；最后用蒸馏水稀释至1 L，保存于塑料试剂瓶中。如无红色或黑色沉淀出现，此试剂可长期使用。
⑶ 标准血清：收集足量的新鲜血清（单份的或混合的)，每100 mL加入叠氮钠50 mg，置于冰箱内分装后冰冻保存。
⑷ 生理盐水，即0.9%的NaCl溶液。
2．器材
⑴ 试管及试管架。
⑵ 刻度吸量管。
⑶ 722型分光光度计。追问热心的网友，我想知道这个问题：硫酸铵盐析、硫酸钠盐析和加热沉淀法等三种方法是否适合使用？
