液相色谱仪的原理是什么?用来干什么?
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发布时间：2022-04-24 23:57
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时间：2022-06-24 14:24
液相色谱仪系统是由由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
液相色谱仪的原理：储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据就可以以图谱形式打印出来，以便研究人员分析。
液相色谱仪的用途：
在聚合物的分析中，吸附色谱一般用来分离添加剂，如偶氮染料、抗氧化剂、表面活性剂等，也可用于石油烃类的组成分析。
用于氨基酸、蛋白质的分析，也适合于某些无机离子(NO3-、SO42-、Cl-等无机阴离子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等无机阳离子)的分离和分析，具有十分重要的作用。
适用于水溶液的体系，又适用于有机溶剂的体系。当所用的洗脱剂为水溶液时，称为凝胶过滤色谱，其在生物界的应用比较多。
拓展回答：
液相色谱仪的应用：高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的*，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。
随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。
参考资料：百度百科 液相色谱仪
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时间：2022-06-24 14:25
液相色谱仪的原理：
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
主要用于对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。
扩展资料
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。
进样系统
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X10Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。
分离系统
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）。
固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。
参考资料：液相色谱仪_百度百科
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时间：2022-06-24 14:25
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。
液相色谱仪工作原理：系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。
深圳埃科瑞仪器设备有限公司是一家集研发、设计、生产、销售、售后为一体的仪器设备公司，公司产品液相色谱仪是完全计算机反控，可以实现远程仪器检测和故障诊断的配备氢火焰离子化检测器（FID）的新一代普及型气相色谱仪。完全PC机控制，界面直观，操作简单。具有自我诊断、断电保护、柱箱过温保护、自动点火等功能。
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时间：2022-06-24 14:26
液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统等组成，是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
应用：
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的*，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视，如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等；液相色谱-红外光谱连用也发展很快如在环境污染分析测定水中的烃类，海水中的不挥发烃类，使环境污染分析得到新的发展。
系统组成及特点：
1、进样系统
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
2、输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X10Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。
3、分离系统
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。
另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。
再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。
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时间：2022-06-24 14:27
在平时的实验中，相信大家都碰到过这些情况：样品摩尔吸光系数太弱、只在短波长区（<210nm）有吸收或是样品量太少。这时，我们在紫外检测器上看不到明显的吸收，只能*走全收集模式。全收集模式的弊端是：不仅看不到出峰情况、无法及时更改梯度，而且会有一些不可避免的样品组份交叉，影响分离效果与分离时间。
那么，有其他检测器可以有效地检测到这些物质吗？答案是肯定的。
蒸发光散射检测器（ELSD）是一种通用型检测器。不同于紫外和荧光检测器，ELSD的响应不依赖于样品的光学特性——任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不用考虑其官能团的最大吸收波长或摩尔吸光系数等影响。
ELSD的响应值与样品物质的量呈指数关系，一般需经对数转换，因而具有高灵敏度并可以用于检测未知物。
另一种常见的通用型检测器是示差折光检测器，其缺点是：不仅对温度、流动相浓度等要求苛刻，无法用于梯度洗脱；且灵敏度不如ELSD。所以，当被测物无UV吸收或者仅有很小的吸收值（ε<100）、流动相又不允许用短波长进行UV测定时，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸等；或是被测物浓度较低时，我们都可以考虑使用ELSD来进行检测。
ELSD的结构如下：首先，样品与流动相混合在一起进入雾化器中，被惰性气体雾化；随后，在加热漂移管中，流动相被蒸发，只留下挥发性低于流动相的样品进入散射池；在激光照射下产生散射光，散射光的强度与组分的浓度成正比；最后，经光电检测器产生电信号，放大后转换成色谱图被记录下来。
ELSD可检测任何挥发性低于所使用流动相的样品，且通过精确控制气压与温度，样品可在一个较低温度下被雾化和蒸发，保持了对热不稳定和挥发性化合物的高灵敏度。同时，因为ELSD会将流动相蒸发掉再检测，所以无需像紫外检测器一样考虑流动相干扰，也可用于梯度分离。最后，辅助载气包裹下的样品颗粒不会分散和沉淀在检测池壁上，极大提高了检测灵敏度，减少检测池表面污染。
但，在拥有上述优点的同时，ELSD也具有相对较昂贵的价格和较繁琐的操作，还需配备氮气等惰性气体。另外，ELSD分流出来用于检测的极小部分样品也会直接通入通风橱中损失掉无法回收，对于一些非常贵重的样品而言会有一点损失。
总体而言，ELSD是补充紫外检测器功能的最佳选择。
