酶切时质粒的量是不是1ug,是可用于所有的体系么?

1ug。质粒酶切1ug量。质粒（plasmid）是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。

拓扑异构酶家族通过断裂和重新连接DNA双链，调节DNA的拓扑状态。分为I、II、III、IV四类，含有特异性的催化核心域。这些酶在细胞核、有时在细胞质中定位，关键作用于DNA复制、转录、修复及染色体分离等过程。相关基因表达具有组织特异性，关键时...

质粒浓度一般以μg/ml来计算，一般双酶切使用质粒的量为20μl使用1μg左右质粒。

少于1ug。酶的用量，双酶切体系中，在共用Buffer中活性低的酶适当加量，其它情况以1ul酶切少于1ug质粒为准，不确定的情况下设置梯度实验。质粒是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，具有自主复制能力。

体系不管多大，都有相应的buffer，只要将buffer变为1x工作浓度就行了，两个同时切的话，需要注意酶的量，看单位是多少，一般是1ul的酶切1ug的质粒或者其它dna序列，尽量酶的体积不能超过体系的10%，因为里面含有甘油，可能会影响酶切效率。

1 20ul体系是最佳体系 2 20ul体系最多切2ug的DNA 3 甘油的量最好是低于体系的5%，最大不超过10 4 酶切效率和酶的质量，保护碱基，酶切位点的位置（同一段DNA不同位置可以差很远，就算是都在中间也是一样的），酶切位点状态（如位点及周围几个碱基是否被甲基化等，有些甲基化后切不开...

建议：首先电泳时要有原质粒作对照，这样你就可以确定跑得快的带是不是未完全切开的质粒了。其次想酶切完全，可延长梅切时间，看你的体系酶的量足够了，而且酶的量本身也不应大于1/10；只是不知梅切的时间。最后若是可以确定两条带中有一条是切开的，则可以利用胶回收纯化的方法得到所需的这一载体...

在一定范围内就行，没有严格规定，十几ng到上百ng都切出来过，DNA多就多加点酶。另外，说明书里也有，1U酶切割1ug的质粒，酶的量不要超过酶切体系的1/10。

体系不管多大，都有相应的buffer，只要将buffer变为1X工作浓度就行了，两个同时切的话，需要注意酶的量，看单位是多少，一般是1ul的酶切1ug的质粒或者其它DNA序列，尽量酶的体积不能超过体系的10%，因为里面含有甘油，可能会影响酶切效率。

回答：第一,酶切没有切过夜的说法,你去查一下说明书,1ug的标准DNA酶切1小时是1活力单位,一般的活力正常的酶,20ul体系加0.5ul酶,切1小时已经足够切开大部分DNA,只有酶连是需要过夜的 第二,很有可能你的酶切体系内污染了DNA酶,而且你切这么久,只要有少量DNA酶存在,切过夜绝对把你的质粒全部...

那么用200ng的质粒保证可以看见。你的质粒DNA加太多了 所以酶切体系可以改改，减少DNA和酶的量，减少时间。1小时足够完成预期的反应。4、其它问题无法回答，因为：是否BamH1/ Hind3都是单一位点？4种样品是一个质粒还是？酶确定没问题？是不是所有双酶切都有1kb片段，大小是否符合预期？