双酶切鉴定实验现象怎么描述

发布网友发布时间：2023-06-27 11:38

共3个回答

热心网友时间：2023-08-09 11:56

单酶切一个电泳道上会有几个比较亮的带。
而且你所根据基因大小所选择的条带内也不一定是你要的。
原因是单酶切形成的粘性末端完全相同，就像拼图，除了内容不同，两边完全切合。所以结合方式过多，可能性也多，如质粒和目的基因正确连接，质粒和目的基因反转连接，质粒和质粒连接，目的基因与目的基因的连接。双酶切一般会有3条带，而且正确现象应只有一个是非常亮的。因为两种酶识别两个位点切开，无论是质粒还是目的片段两端的粘性末端完全不同，还是拼图，内容不同，两端切合口也不同，除了一种连接方式外没有其他连接了。胶途中3条带分别为：目的片段条带，空质粒条带，最亮的重组质粒条带。

热心网友时间：2023-08-09 11:56

1. 同步双酶切同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB 每一种酶都随酶提供
2. 分步酶切如果找不到一种可以同时适合两种酶的缓冲液,就只能采用分步酶切。分步酶切应从反应要求盐浓度低的酶开始,酶切完毕后再调整
3. 使用配有特殊缓冲液的酶进行双酶切(图)

热心网友时间：2023-08-09 11:57

1. 同步双酶切同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB 每一种酶都随酶提供
2. 分步酶切如果找不到一种可以同时适合两种酶的缓冲液,就只能采用分步酶切。分步酶切应从反应要求盐浓度低的酶开始,酶切完毕后再调整
3. 使用配有特殊缓冲液的酶进行双酶切(图