我做PCR为什么筛温度的时候都能P出条带,等到筛好温度了却没有条带了...
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发布时间：2023-09-27 12:25
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PCR的模板或引物比较复杂时，各种怪事都会有。如果你的实验体系没问题，你可以试试先以较高退火温度p上5个循环，再以你筛的温度p上30个循环。或者把你的目的条带切胶回收，稀释后作模板再p。
pcr开始有条带,后来怎样都没条带1. 你之前从质粒上能P出来，质粒还有么，要不然用质粒做个正对照？质粒能P出来，基因组P不出来，可能是基因组的质量不太好。2. 你做的时候带上一个你能做出PCR的正对照，表明你一次操作的正确性。3. 换Taq酶试试，看看是不是你的酶问题（因为Taq酶的保真性不高），看看能不能P出来，如果能，...
求救!pcr产物没有条带...首先你保证自己的操作是没有问题的，看看你自己以往操作的结果好不好就能知道，如果同样的条件下你一直都是有时候能P出来有时候不行，那就是你的技术问题。其次检查PCR试剂，是不是有的试剂时间长或者污染了，变质了，失效了。特别是Taq和dNTP这两样，最容易出问题。PCR仪器也检查下，程序是否正常，样...
菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确?因 不同的酶反应条件不一样，
PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么1，可能是模板量过高，降低模板浓度10-1000倍；2，适当提高退火温度1-3度，或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环，再用先前温度p剩余的循环（也就是在程序中多设置2步）；3，稍降Mg离子浓度，如果以前加1.5ul的，试试1-1.2ul；如果以上方案还不能解决，就要检查你的模板、引物和...
...过了半个月后又重新做阳性PCR跑电泳,结果没有条带?原因有哪些?_百度...1、PCR试剂污染，加错，失活；2、模版被降解；3、PCR仪坏了。
PCR扩增后没有条带是怎么回事物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。有时还有必要用标准的温度计，检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度，这也是PCR失败的原因之一。靶...
克隆实验中,pcr后跑胶,没有出现条带,为什么这个有许多原因，跑电泳有对照吗？比如marker.如果没有就是电泳问题，如果有，你看下有没有引物二聚体，如果没有，pcr整体肯定忘加东西了，需重做，如果有，就是你pcr体系本身有问题，需要优化，或是你的引物不好，需重新设计
为什么PCR有时有条带有时没有条带那可能PCR反应进行的不好,没有得到充足的DNA片段 建议改善反应条件，重新做一便．你看下这个步骤：1. 基因组DNA 的制备 参照萨姆布鲁克等(1996) 的方法略加改进,取足肌约100 mg 切碎并溶于裂解液中,加入蛋白酶K 至终浓 度为100μg/ ml ,充分混匀后37 ℃消化4～5 h 。加入RNase 至终浓度...
菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确?菌落PCR的假阳性高很可能是因为你做PCR的循环数过大，我们实验室一般对于高拷贝数的质粒，循环数不会超过25个，一般用25个。假阳性出现的原因关键在于做连接的时候加了比较多的目的基因的酶切产物，在转化时，那些没有连接入载体的PCR产物，有的会沾在感受态细胞上，还有的虽然在溶液中，涂板时一起就...
