夹心ELISA的标准曲线没有梯度是怎么回事

发布网友发布时间：2023-08-04 16:10

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热心网友时间：2024-12-13 07:43

双抗体夹心法，包被抗体的浓度一般都在5-10微克/ml，尽管抗体很贵，可如果你只包0.1或0.2的话是看不出效果的。我不知道你的预试验是怎么做的，但是有一点可以肯定，你的包被抗体太少。

一般的饱和包被浓度在1-2ug/ml。如果没有饱和那么你最低点的标准品很可能就把包被抗体全部反应掉了，这样自然拉不出梯度来。建议还是再分析一下预实验中的结果，找到包被饱和浓度，在这个附近进行包被。否则实验做坏了，那些浪费掉的标准品、酶标抗体也是钱啊。

其次，包被时间过长，对包被抗体的损害也比较大。我的同事做过实验，4度包被小鼠IgG时，超过了大约10个小时以后，CV明显上升。