外泌体小知识(一)
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发布时间：2023-07-25 23:32
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时间：2024-07-17 23:08
外泌体广泛参与细胞间物质运输与信息传递，*细胞生理活动。同时，外泌体具有抗原提呈、免疫逃逸、诱导正常细胞转化、促进肿瘤发生和转移等作用；此外，外泌体还可以作为“天然的纳米粒子”来进行药物递送。
外泌体研究通常进行以下几个方面的实验：1.试剂盒或差速超速离心分离；2.透射电镜拍摄（TEM）；3.纳米粒径跟踪分析（NTA）；4.Western Blot检测蛋白标志物；5.外泌体高通量测序/芯片；6.外泌体标记或示踪；7.外泌体细胞功能检测；8.外泌体动物模型验证等。
其中，外泌体分离之后，需要经过一系列鉴定才能确定分离的是外泌体。鉴定方法从物理特征到表面分子标志物，多角度进行鉴定。
(1)透射电镜鉴定法 ：简称TEM，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，即通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。
(2)纳米颗粒跟踪分析法 ：简称NTA，该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快，检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。
(3)Western blot分子标志物检测 ：外泌体标志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；细胞质蛋白，如肌动蛋白（Actin）和钙磷脂结合蛋白（Annexins）；参与生物功能的分子，如凋亡转接基因2互作蛋白X（ALIX）、肿瘤易感基因101蛋白（TSG101）、热休克蛋白（HSP70、HSP90），以及细胞分泌的特异性蛋白。
(4)外泌体高通量检测 ： 外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质和核酸，可以运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等进入受体细胞，参与细胞间通讯。不同细胞来源的外泌体所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作为多种疾病的早期诊断标记物，也能作为靶向药物的载体进行疾病治疗。
(5)外泌体标记或示踪： 对分离的外泌体进行体外标记或活体示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前常用亲脂性染料对外泌体进行标记，亲脂性染料主要包括两类，一是PKH67（绿色）和PKH26，二是DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光）。
(6)外泌体功能研究： 将标记的外泌体加入受体细胞培养基中，与受体细胞进行共培养，观察细胞的功能变化，如细胞增殖、迁移与侵袭、细胞凋亡等；或者将外泌体注射入动物模型中，观察动物表型变化和检测动物相关指标。
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时间：2024-07-17 23:09
它是指外泌体特指直径在40-100nm的盘状囊泡。经历了从“细胞废物”到“细胞宝藏”的神奇逆袭经历，1983年，外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现，当初被认为是细胞新陈代谢的产出“废物” 其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中，在肺疾病中的研究很多，主要是对细胞的修复与再生，具有消炎抗菌、提高免疫力等作用，在这方面的，听说过CellBioFix好像是做这方面的
