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同源重组时,pcr片段5端是羟基,怎么连上去

发布网友 发布时间:2023-07-26 11:24

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热心网友 时间:2024-11-17 10:15

在司源重组过程中,PCR片段5端是羟基需要通过连接酶酰化反应进行连接。在连接酶酰化反应中,需要通过连接酶和适当的连接试剂来完成连接。连接酶一般选择T4 DNA连接酶,连接试剂选择T4 DNA连接酶缓冲液、ATP、MgCl2和CSD。连接酶酰化反应的条件为16℃下反应两小时,反应后的连接产物可以通过ADH裂解试验来检验是否连接成功。
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