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精浆弹性硬蛋白酶的检测步骤

发布网友 发布时间:2023-07-22 15:48

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热心网友 时间:2023-09-21 08:41

(1)准备适当数量的包被微孔。标准品、稀释标本加样量均为100μl/孔。五个标准品浓度依次为3000、1500、750、375 和0ng/ml(以标本稀释液作为0 标准)。
(2)用封片膜封板。以孵育振荡器(350 ~400rpm)室温(18 ~28℃)反应60min。
(3)弃去封板膜。洗板: 以洗涤液注满微孔,每次浸泡1min,共洗板5 次。扣干。
(4)每孔加酶结合物100μl。用封板膜封板。以孵育振荡器( 350 ~400rpm) 室温(18 ~28℃)反应45min。
(5)弃去封板膜。洗板:以洗涤液注满微孔,每次浸泡1min, 共洗板5 次。扣干。
(6)每孔加显色液100μl, 室温避光反应20min[显色液临用前配制。方法是:显色剂A: 显色剂B按体积比40: 1混合( 如显色剂A 400μl + 显色剂B 10μl),显色液配制后30min 内使用]。
(7) 每孔加终止液100μl,充分混匀。15min 内上酶标仪双波长450/630nm 比色。

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